生物化学与分子生物学实验指导

第一篇基础理论和技术

第一章 离心技术

第一节 基本原理

第二节 离心机的种类和基本结构

第三节 常用离心技术

第四节 离心技术在生物学研究中的应用

第二章 分光光度法

第一节 基本原理

第二节 分光光度计

第三节 分光光度技术的应用

第三章 层析技术

第一节 层析基本理论

第二节 常用的层析技术

第四章 电泳技术

第一节 基本原理

第二节 电泳的分类

第三节 常用的电泳技术

第五章 生物化学实验样品制备技术

第一节 生物大分子制备的特点和一般步骤

第二节 植物样品的制备

第三节 动物样品的制备

第四节 微生物样品的制备

第五节 生物大分子——蛋白质

第六节 生物大分子——核酸

第六章 真核生物基因文库的构建

第一节 cDNA文库的概念

第二节 cDNA文库构建的策略

第三节 cDNA文库的筛选

第七章 核酸杂交技术

第一节 分子杂交的一般过程

第二节 分子杂交的种类

第三节 探针

第四节 印迹技术

第五节 杂交体系

第六节 杂交信号的检测方法

第八章 聚合酶链式反应

第一节 聚合酶链式反应的发展历史

第二节 PCR的原理

第三节 PCR体系与条件

第四节 PCR循环参数的确定

第五节 PCR需注意的事项

第六节 PCR的种类及用途

第九章 基因工程

第一节 基因工程的基本概念

第二节 基因工程的发展历史

第三节 基因工程的研究意义

第四节 基因工程的基本内容

第十章 DNA序列测定技术

第一节 概述

第二节 Sanger双脱氧链终止法

第三节 Maxam-GilbertDNA化学降解法

第四节 测序策略

第五节 DNA序列测定自动化

第十一章 生物芯片技术

第一节 生物芯片的概念

第二节 生物芯片技术的发展历史

第三节 生物芯片的分类及特点

第四节 常用生物芯片的应用

第二篇 生物化学实验

第十二章 生物化学基础实验

实验一 缓冲溶液的配制和氨基酸两性性质的测定

实验二 分光光度计线性分辨范围的测定

实验三 还原糖和总糖含量的测定

实验四 用阳离子交换树脂摄取氯化钠

实验五 蛋白质的沉淀反应

实验六 定磷法测定RNA含量

实验七 紫外吸收法测定核酸的含量

实验八 可溶性糖的硅胶G薄层层析

实验九 血糖含量的测定

实验十 血清总胆固醇的测定

实验十一 血清甘油三酯的测定

实验十二 维生素C含量的测定（2，6-二氯酚靛酚法）

实验十三 氨基氮测定——甲醛滴定法

实验十四 酵母RNA的分离及组分鉴定

第十三章 生物化学综合实验

实验十五 双缩脲法测定蛋白质含量

实验十六 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量

实验十七 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量

实验十八 离子交换柱层析法分离氨基酸

实验十九 从牛奶中分离制备酪蛋白

实验二十 葡聚糖凝胶层析

实验二十一 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

实验二十二 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质

实验二十三 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白质

实验二十四 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子量

实验二十五 蛋白质印迹（Western blot）

实验二十六 血清谷丙转氨酶活性的测定

实验二十七 酶的专一性

实验二十八 激活剂和抑制剂对酶活性的影响

实验二十九 温度对酶活性的影响

实验三十 pH对酶活性的影响

实验三十一 底物浓度对酶促反应速度的影响——Km值的测定

实验三十二 绿豆超氧化物歧化酶的提取

实验三十三 硫酸铵沉淀法纯化SOD

实验三十四 葡聚糖凝胶层析脱盐

实验三十五 有机溶剂分级沉淀法纯化SOD

实验三十六 离子交换层析法纯化SOD

实验三十七 SOD活性的测定

实验三十八 绿豆SOD同工酶的鉴定

实验三十九 等电聚焦电泳法测定SOD的纯度及等电点

第三篇 分子生物学实验

第十四章 分子生物学基础实验

实验四十 质粒DNA的提取及纯化

实验四十一 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验四十二 DNA酶切与连接

实验四十三 DNA片段的回收

实验四十四 植物组织基因组DNA的提取

实验四十五 动物组织基因组DNA的提取

实验四十六 细菌基因组DNA的制备

实验四十七 大肠杆茵感受态细胞的制备

实验四十八 外源DNA的连接与转化

实验四十九 重组转化子的酶切鉴定

第十五章 分子生物学综合实验

实验五十 PCR扩增外源基因

实验五十一 Triz01法提取总RNA

……

第四篇 创新性实验

附录

参考文献

《生物化学与分子生物学实验指导》涉及面较广，并且有一些较大型的连续性实验，还有部分实验来源于教师的科研成果。我们希望通过《生物化学与分子生物学实验指导》的学习，使学生能够顺利完成根据实际情况所选择的实验内容，掌握生物化学与分子生物学实验最基本的技术，并在今后的研究和工作中能灵活应用。