实用miRNA研究进展

第1篇miRNA的基础理论

绪论

第1章miRNA的发现及其进化史

第1节miRNA的发现

一、lin4在线虫动物发育基因表达中的调节作用

二、let7的发现及其在动物中的保守性

三、动物中其他的miRNA

四、植物中的miRNA

五、动物和植物miRNA的区别

第2节miRNA基因的进化

第3节动物中miRNA功能的保守性

第2章miRNA基因组、表达模式与命名原则

第1节miRNA的编码基因在基因组中的位置

第2节miRNA基因组的表达模式

第3节miRNA的命名规则

第3章miRNA的生物合成

第1节概述

第2节细胞核内miRNA编码基因的转录与转录初产物剪接、加工过程

第3节premiRNA经exportin5由细胞核输出

第4节Dicer加工及miRNA的成熟

第4章miRNA的功能及作用机制

第1节miRNA的功能

第2节miRNA的作用机制

一、RNA诱导沉默复合体（RISC）的形成

二、miRNA诱导的基因沉默模式及其相关机制

第3节miRNA的周转与修饰

第4节miRNA表达研究

第5节miRNA靶标的预测及miRNA研究的相关数据库

一、miRNA的预测原则

二、miRNA鉴定与预测软件简介

第6节人类基因组中miRNA基因的组成

第7节人工miRNA

第8节结语

参考文献

第2篇miRNA与医学

第5章miRNA与发育

第1节miRNA在生殖细胞及胚胎发育中的作用

一、生殖细胞的发生

二、胚胎早期发育的基本过程

三、miRNA与生殖细胞的发育

四、miRNA与胚胎早期发育

参考文献

第2节miRNA在肾脏发育中的作用

一、肾脏的基本结构

二、肾脏的发生

三、miRNA与肾脏发育

四、miRNA在肾脏发育中的时序性调控

参考文献

第3节miRNA在血液及免疫

系统发生中的作用

一、血细胞的发生

二、miRNA调控造血干细胞定向分化潜能和自我更新

三、miRNA与淋巴细胞发生及获得性免疫

四、miRNA与粒细胞、单核细胞的发生和天然免疫

五、miRNA与血小板发生

六、miRNA与红细胞发生

参考文献

第4节miRNA在心血管系统发育中的作用

一、心血管的结构及其发生

二、miRNA与心肌细胞分化

三、miRNA与心脏发育

四、miRNA与血管发育

参考文献

第5节miRNA在神经系统发育中的作用

一、神经系统的基本结构

二、神经系统的发生

三、miRNA与中枢神经系统的发育

四、miRNA与神经干细胞及神经祖细胞的发育

五、miRNA与神经元成熟及突触形成

参考文献

第6节miRNA在消化系统发育中的作用

一、miRNA与胰腺的发育

二、miRNA与肝脏的发育

参考文献

第6章miRNA与肿瘤

第1节miRNA与肿瘤的发生和发展

一、肿瘤中miRNA异常表达与调控

二、miRNA作为癌基因及抑癌基因

三、miRNA与肿瘤的侵袭和转移

参考文献

第2节miRNA与细胞凋亡

一、miRNA与Bcl2 家族

二、miRNA与p53

三、miRNA与cMyc

四、miRNA与caspase

五、miRNA与PDCD4

六、miRNA与凋亡信号转导途径

七、miRNA诱导细胞凋亡的调控环路

参考文献

第3节miRNA与肿瘤的诊断

一、miRNA与生物标记物

二、miRNA作为潜在肿瘤标记物的研究进展

三、miRNA作为肿瘤标记物待解决的问题

参考文献

第4节miRNA与肿瘤研究及治疗

一、下调miRNA的功能与肿瘤研究及治疗

二、上调miRNA的功能与肿瘤研究及治疗

三、miRNA治疗研究中常用的载体系统

四、干扰miRNA功能的药物

五、miRNA与肿瘤化疗

参考文献

第5节miRNA与各系统肿瘤

一、miRNA与乳腺癌

二、miRNA与前列腺癌

三、miRNA与结、直肠癌

四、miRNA与肺癌

五、miRNA与卵巢癌

六、miRNA与急性髓性白血病

参考文献

第7章miRNA与病毒性疾病

第1节病毒编码的miRNA生物起源

第2节病毒miRNA的功能

一、病毒编码miRNA及其对病毒mRNA的表达调节

二、病毒编码miRNA的特点

三、病毒编码的miRNA对宿主基因的调控

第3节宿主miRNA对病毒感染的影响

一、细胞miRNA对病毒基因表达的直接调节

二、miRNA对病毒复制的间接影响

第4节miRNA在病毒发病过程中作用的局限性

第5节不同类型病毒的miRNA

一、EB病毒编码的miRNA

二、HIV病毒相关miRNA

三、SV40编码的miRNA

四、卡波济肉瘤相关疱疹病毒编码的miRNA

五、其他病毒编码的miRNA

第6节病毒、miRNA与肿瘤

第7节应用与展望

参考文献

第8章miRNA与人类其他疾病

第1节miRNA与内分泌疾病的概述

一、miRNA与糖尿病

二、miRNA与脂代谢

三、结语

参考文献

第2节miRNA与神经系统疾病

一、miRNA与神经系统疾病概述

二、miRNA与神经退行性疾病

三、miRNA与神经细胞凋亡相关性疾病

四、miRNA与其他神经系统疾病

五、小结

参考文献

第3节miRNA与造血及血液系统疾病

一、miRNA在血液系统疾病中的研究

二、结论与展望

参考文献

第4节miRNA与心血管系统疾病

一、正常心脏中的miRNA

二、miRNA与心血管系统相关

疾病

参考文献

第9章miRNA在临床疾病诊断与治疗中的应用前景

第1节miRNA在临床治疗中的应用前景

一、miRNA作为临床诊治标志物的研究现状

二、miRNA介导的基本治疗方

三、miRNA介导的临床治疗所面临的机遇与挑战

第2节miRNA在相关疾病中的应用前景

一、miRNA在内分泌系统疾病中的治疗靶点及其应用

二、miRNA在神经系统疾病中的治疗靶点及其应用

三、miRNA在造血系统疾病中的治疗靶点及其应用

四、miRNA在循环系统疾病中的治疗靶点及其应用

五、miRNA在病毒性疾病中的研究及其应用

第3节结语

参考文献

第3篇miRNA相关检测技术

第10章miRNA提纯技术

第1节miRNA在新鲜组织及冰冻组织中的提纯

一、简介

二、实验方法

第2节miRNA在福尔马林固定石蜡包埋组织中的提纯

一、简介

二、实验方法

第3节miRNA在细胞中的提纯

一、简介

二、实验方法

三、试剂

四、操作过程

第4节miRNA在血清中的提纯

一、简介

二、实验方法

参考文献

第11章miRNA芯片技术

第1节简介

第2节实验方法

一、材料

二、仪器设备

三、试剂

四、操作过程

五、应用与限制

参考文献

第12章印迹杂交技术

第1节简介

第2节实验方法

一、材料

二、仪器设备

三、试剂

四、操作过程

五、应用与限制

参考文献

第13章原位杂交法

第1节探针

一、RNA探针

二、DNA探针

三、LNADNA寡核苷酸探针

第2节杂交步骤

一、杂交前准备

二、细胞和组织切片的杂交前预处理

三、杂交

四、杂交后处理

五、显示

六、对照

七、miRNA原位杂交技术注意事项

第3节石蜡切片miRNA的原位杂交法

一、仪器设备

二、试剂

三、试剂配方

四、操作步骤

第4节冰冻切片miRNA的原位杂交法

一、仪器设备

二、试剂

三、试剂配方

四、操作步骤

第5节整体原位杂交法

一、简介

二、仪器设备

三、试剂

四、试剂配方

五、操作步骤

第6节原位杂交技术的新探索

一、ultramer寡核苷酸扩展法

二、连续切片法原位检测miRNA、mRNA及靶蛋白

参考文献

第14章miRNA的实时、定量PCR检测

第1节序言

参考文献

第2节终点茎环实时RTPCR法对miRNA的定量检测

一、简介

二、实验方法

三、应用与限制

参考文献

第3节miRNA全定量RTPCR法（miRQ）

一、简介

二、实验方法

三、应用与限制

参考文献

第4节Poly（A）加尾性反转录法

一、简介

二、实验方法

三、应用与限制

参考文献

第5节miRNA表达谱的RTPCR微阵列分析

一、简介

二、实验方法

三、应用与限制

参考文献

第6节miRNA扩增谱系（miRAP）

一、简介

二、实验方法

三、应用与限制

参考文献

第7节miRNA的实时、定量PCR技术应用实例分析

一、导言

二、通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向mRNA的相对定量分析

参考文献

第15章克隆技术

第1节简介

第2节实验方法

一、材料

二、仪器设备

三、试剂

四、操作过程

第3节应用与限制

参考文献

第16章血清和血浆中miRNA的检测技术

第1节简介

第2节实验方法

一、材料

二、仪器设备

三、试剂

四、操作过程

第3节应用与限制

参考文献

第17章母系血浆中胎盘miRNA的检测

第1节简介

第2节实验方法

一、材料

二、仪器设备

三、试剂

四、操作过程

第3节应用与限制

参考文献

第18章单一细胞内miRNA的检测

第1节简介

第2节实验方法

一、用茎环RTqPCR法检测单个人胚胎干细胞中的miRNA

二、LNAELFFISH方法

第3节应用与限制

参考文献

第19章miRNA功能报告基因表达检测技术

第1节简介

第2节实验方法

一、以Fluc为报告基因的miRNA传感器（以hsamiR223为例）

二、利用分泌型荧光素酶基因表达

变化监测活细胞中miRNA活性的新方法

第3节应用与限制

参考文献

第20章miRNA靶基因预测与鉴定

第1节引言

第2节miRNA靶基因的生物信息学预

测及常用靶基因预测软件

一、简介

二、软件使用方法

三、应用与限制

第3节miRNA靶基因的鉴定

一、miRNA 模拟物（或靶基因siRNA）瞬时转染细胞实验

二、用报告基因法确定miRNA靶基因

第4节miRNA相关数据库

一、简介

二、miRNA靶基因数据库使用方法

三、应用与限制

参考文献

英汉索引

本书详细阐述了miRNA的基础理论，并针对医药卫生研究者的特点，注重实践操作，对不同技术方法的可行性及局限性进行了详细的论述。同时，本专著还包含了作者近年来在miRNA研究实践中的一些发明及对最新技术应用的体会，有助于miRNA研究人员在实际科研工作中扬长避短，节省时间，获得最佳研究成果。

本专著还包含了作者近年来在miRNA研究实践中的一些发明及对最新技术应用的体会，有助于miRNA研究人员在实际科研工作中扬长避短，节省时间，获得最佳研究成果。