真核生物转录调控

译者序

前言

概述

缩略词

1 哺乳动物细胞转录调控入门

引言和概述

全基因组方法小结

染色质和通用转录机器

染色质结构和组织

染色质修饰

染色质重塑

通用转录机器

调控区的组织

基础转录复合物的组装和起始

调解因子

TFIID和TAF

活化和抑制

基因活化

转录起始期间的染色质修饰和重塑

通用机器募集的一种模式

聚合酶II延伸的初始阶段

聚合酶II在基因内遭遇核小体

转录的沉默或抑制

结语

参考文献

2 初始策略性问题

引言和概述

实验策略

新转录因子的表征方法

分析新基因的调控

专题2.1 核连缀转录分析

考虑达到明确目标所需的时间投入和资源

确定项目目标

评估分析的可行性

启动对新基因的综合转录调控分析

技术

方案2.1 核连缀分析

参考文献

3 转录起始位点的定位

引言和概述

实验策略

初步考虑

快速扩增cDNA末端（RACE）

专题3.1 帽子依赖性RACE程序

引物延伸

专题3.2 引物延伸

RNase保护法

专题3.3 RNase保护

Sl核酸酶分析

专题3.4 核酸酶保护

专题3.5 内含子对起始位点定位结果解释的影响

技术

方案3.1 引物延伸分析

方案3.2 RNase保护分析

参考文献

4 启动子分析的功能性分析方法

引言和概述

实验策略

选择分析方法：各种分析方法的优缺点

瞬时转染分析

专题4.1 常用的转染方法

专题4.2 萤光素酶报告基因分析

专题4.3 CAT报告基因分析

专题4.4 LacZ、SEAP和GFP报告基因分析法

专题4.5 瞬时转染细胞的分离

通过染色体整合的稳定转染分析

专题4.6 有复制能力的载体

技术

哺乳动物细胞的常用转染方法

方案4.1 3T3成纤维细胞的磷酸钙转染

方案4.2 淋巴细胞系的DEAE-葡聚糖转染

方案4.3 RAW264.7 巨噬细胞的电穿孔转染

方案4.1 ～4.3 的附加说明

方案4.4 萤光素酶分析

方案4.5 氯霉素乙酰转移酶分析

方案4.6 β-半乳糖苷酶分析

参考文献

5 远程控制区的鉴定和分析

6 鉴定控制区内的顺式作用DNA元件

7 鉴定DNA结合蛋白及其基因

8 确认蛋白质-DNA相互作用的功能相关性

9 内源性控制区的体内分析

10 鉴定和表征转录调控因子的结构域

11 DNA的调控性转录因子结合

12 体外转录和起始前复合物组装

13 体外研究染色质动力学：染色质组装、重塑和转录

附录：注意事项

索引

《生命科学实验指南系列·真核生物转录调控：概念、策略与技术（第2版）》是美国冷泉港实验室出版社出版的《真核生物转录调控--概念、策略与技术》（第二版）一书的中译本。书中全面介绍了真核基因转录调控的概念，以及进行研究所使用的策略和技术。涉及内容包括哺乳动物细胞转录调控入门知识、基因转录调控的两个重要角色-DNA元件和蛋白质组分的鉴定及功能表征，以及两者间复杂的相互作用构成的基因转录调控的重要事件和这些事件发生的染色质环境。
《生命科学实验指南系列·真核生物转录调控：概念、策略与技术（第2版）》概括了真核基因转录调控的基本概念、实施转录调控研究的基本策略，以及实现研究目标的重要技术。因此，《生命科学实验指南系列·真核生物转录调控：概念、策略与技术（第2版）》对于医学、生物化学、分子生物学、生物技术等领域中对基因转录调控感兴趣或从事相关研究的学生、教学科研人员和技术人员是一本重要读物。