精编人类遗传学实验指南

译者名单

译者序

前言

编写人员

第1章基因定位

单元1．1连锁研究所需临床和流行病学资料的收集

单元1．2家系选择和信息含量

单元1．3单精子分型

单元1．4采用LINKAGE软件包进行连锁分析

单元1．5非模式依赖的遗传连锁检验

单元1．6利用DNA池技术进行纯合子定位

单元1．7疾病关联和基于家系的检验

单元1．8基因一基因相互作用的分析

第2章基因分型

单元2．1基于PCR的基因分型方法

单元2．2基于连接分析的分型方法

单元2．3自动荧光的分型方法

单元2．4用微阵列的方法分型单核苷酸多态

单元2．5使用TAQMAN分析法的高通量基因分型

单元2．6使用引物延伸荧光偏振探测法的高通量基因分型

第3章体细胞杂交简介

单元3．1体细胞杂交的构建

第4章细胞遗传学

单元4．1经培养外周血细胞的染色体制备

单元4．2小鼠细胞染色体制备及核型分析

单元4．3染色体显带技术

单元4．4中期染色体和间期核的原位杂交

单元4．5高分辨率FISH分析

单元4．6多色荧光原位杂交(FISH)方法分析人类完全基因组

单元4．7应用形态学抗体染色体技术确定细胞的表型与基因型

单元4．8比较基因组杂交

第5章大片段的克隆和分析

单元5．1大范围限制性图谱：脉冲电场电泳

单元5．2用杂交的方法筛选大片段插入的文库

单元5．3胚胎将大片段插入DNA导入哺乳动物细胞和胚胎

单元5．4BAC／PAC文库的构建

第6章确定基因组DNA候选基因

单元6．1基因鉴定：方法和注意事项

单元6．2序列数据库：整体信息的检索和数据的提交

单元6．3使用BLAST程序家族查找序列相似性

单元6．4人类基因组的获取

单元6．5使用Entrez来检索NCBI数据库

第7章搜寻候选基因突变的方法

单元7．1患病个体的序列扩增

单元7．2通过单链构象多态性分析检测基因突变

单元7．3毛细管电泳法分析单链构象多态性

单元7．4应用基于荧光的自动化测序进行杂合体检测

单元7．5用循环测序法检测突变

单元7．6人类突变数据库

第8章临床细胞遗传学

单元8．1绒毛标本分裂中期染色体涂片制备

单元8．2羊水标本的制备、培养和分析

单元8．3用于染色体分析的妊娠产物及其他同体组织来源样本的培养及制备

单元8．4姐妹染色单体互换(SCE)分析

单元8．5利用石蜡包埋组织鉴定染色体非整倍体

单元8．6羊水细胞用于间期核FISH分析的制备方法

单元8．7范可尼贫血(先天性骨髓发育不全)的诊断二氧桥丁烷(双环氧丁烷)检测

第9章临床分子遗传学

单元9．1运用多重PCR检测营养不良基因缺失

单元9．2利用等位基因特异性寡聚核苷酸(AllelespecificoIigomacleotide，ASO)同时检测多点突变

单元9．3脆性X综合征的分子分析

单元9．4肌强直性肌营养不良(myotonic：dystrophin，DM)的三核苷酸重复的分析

单元9．5非随机X染色体失活的检测

单元9．6父子关系的分子分析

单元9．7点突变不易扩增突变系统(简称ARMS)分析

单元9．8线粒体DNA突变缺失氧化磷酸化疾病的分子分析

单元9．9单细胞DNA和FISH分析应用于植入前基因诊断

单元9．10蛋白质截短试验

单元9．11载脂蛋白E(apolipoproteinE，APOE)基因型分析：不同方法间比轻

第10章癌基因组学

单元10．1收获分裂中期的细胞对恶性肿瘤患者的血液标本进行细胞遗传学分析

单元10．2实体瘤培养分裂中期细胞的收获和细胞遗传学分析

单元10．3分子生物学方法分析白血病和非霍奇金氏淋巴瘤的DNA重组

单元10．4肿瘤中基因扩增的分子分析

单元10．5甲基化特异性PCR

第11章转录谱

单元11．1用于表达监测的寡核苷酸分析

单元11．2用CDNA芯片分析人类基因表达

单元11．3表达数据分析概述

第12章基因治疗载体

单元12．1基因转移载体的生物安全性问题

单元12．2腺病毒载体

单元12．3重组腺相关病毒载体的生产

单元12．4反转录病毒载体的制备

单元12．5假包膜型反转录病毒载体的制备

单元12．6高滴定度慢病毒载体产物

单元12．7构建复制缺陷型疱疹单纯病毒载体

单元12．8应用辅助病毒缺陷HSV_1扩增载体进行基因传递

单元12．9脂质体载体用于直接体内基因转染

第13章基因治疗的转移系统

单元13．1动脉的基因转移

单元13．2基因传递到肌肉

单元13．3脑的基因转移：间接体内法和直接体内法

单元13．4人造血干细胞的培养、转导和分析

单元13．5呼吸道基因给药

单元13．6基因传递到肝脏

参考文献

附录1试剂与溶液

附录2有用的信息和数据

附录2A人类重复DNA序列概述

附录2BISCN标准核型模式图

附录2C遗传连锁参考图谱：基于互联网资源的入口

附录2D放射性同位素数据

附录2E离心机和转子

附录3常用技术

附录3A从哺乳动物细胞中提取基因组DNA

附录3BDNA的抽提和沉淀

附录3C从固定的石蜡包埋组织切片中制备DNA

附录3D使用分光光度计和荧光分光光度计测定DNA和RNA的含量

附录3EDNA酶标记法

附录3F变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

附录3GSouthern杂交法分析DNA

附录3HNorthern杂交分析RNA

附录3I哺乳动物细胞组织培养技术

附录3J通过EB病毒转化建立恒定的细胞系

附录3K核型分析

附录4一些试剂和仪器提供商

索引

　　本书作者Nicholasc．Dracopoli等通过丰富、翔实的理论及最新实验技术，以一种新的方式系统介绍了全部现代人类遗传学的理论及实验技术，以及最新的实验室方法，集科学性、系统性、指导性、实用性、方便性、有效性于一体。同时，该书还具有广泛的推广性，适于从事遗传学相关专业研究的研究人员、临床医生，特别是临床遗传专科医生以及各类农、林、医类院校不同层次和不同专业的本科生、研究生使用。　　本书包括十三章内容和相关附录，详细介绍了遗传作图、基因分型、体细胞杂交、细胞遗传学、分子克隆、致病或易感基因定位克隆、临床遗传学与临床分子遗传学、肿瘤遗传学、转录组学、基因治疗载体、基因治疗策略等内容，分别介绍了相关的基础知识、科学原理、实验方法等。　　本书是一本专门供从事遗传学及相关专业研究及教学的研究人员、研究生、教师等参考的实验书籍。