分子生物学与细胞生物学基础实验教程

第一部分 分子生物学实验

实验的总体设计和实验日程安排

实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化

实验二 质粒DNA的提取

实验三 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验四 DNA重组

实验五 转化后细菌菌落的快速裂解及质粒大小的检查

实验六 重组DNA的酶切鉴定

实验七 大肠杆菌中表达的GFP的超声破碎抽提

实验八 GFP血清抗体的琼脂免疫双扩散检测

实验九 非变性条件下GFP的制备电泳

实验十 GFP血清抗体的快速亲和纯化

实验十一 免疫印迹

实验十二 GST的亲和纯化与纯化过程的SDS．PAGE分析

实验考勤及完成情况登记表

第二部分 细胞生物学实验

四膜虫简介

实验一 四膜虫的计数

实验二 一些化学试剂对四膜虫影响的观察

实验三 四膜虫吞噬的观察及酸性磷酸酶染色

实验四 福尔根染色显示四膜虫细胞核DNA

实验五 四膜虫饥饿诱导后接合行为与细胞核变化的姬姆萨染色观察

实验六 四膜虫细胞核与纤毛的分离

实验七 间接免疫酶标染色显示四膜虫纤毛

实验八 牛蛙骨髓细胞染色体的制备

实验九 CH0细胞药物合并离心处理后中间纤维的免疫酶标染色

主要参考文献

附录一：GFP和GST血清抗体的制备

附录二：实验所需设备器材清单

《分子生物学与细胞生物学基础实验教程》为一本实验操作指导，分为分子生物学实验与细胞生物学实验两个部分。分子生物学实验包括大肠杆菌感受态细胞的制备及转化、质粒DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳、DNA重组、重组DNA的酶切鉴定、大肠杆菌中表达蛋白的超声破碎抽提、蛋白质的制备电泳、血清抗体的快速亲和纯化、免疫印迹、GST的亲和纯化及纯化过程的SDS—PAGE分析等；细胞生物学实验以四膜虫为主要实验材料，包括细胞计数、酸性磷酸酶染色、福尔根染色、姬姆萨染色、细胞核与纤毛的分离以及间接免疫酶标染色显示纤毛等实验，还补充了牛蛙骨髓细胞染色体的制备和CHO细胞中间纤维的免疫酶标染色两个实验。
《分子生物学与细胞生物学基础实验教程》可作为一般综合性院校、师范院校和农业院校有关专业的分子生物学实验和细胞生物学实验的教材或实验教学参考书，对有关的初、中级研究人员也有一定的参考价值。