生物化学实验技术

单元一生物技术实验要求与基本技能

一、实验室规则

二、实验记录及实验报告

三、实验误差与数据处理

四、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制

五、常用仪器的使用方法

单元二分光光度技术

一、光的基本知识

二、吸光度与透光率

三、朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律

四、分光光度计结构简介

五、分光光度技术的应用

六、分光光度法的误差

单元三电泳技术

一、电泳的基本原理

二、影响迁移率的主要因素

三、电泳的分类

四、几种常见的电泳法

五、电泳后的染色

六、电泳结果处理

单元四层析技术

一、吸附层析

二、分配层析

三、离子交换层析

四、凝胶层析

五、亲和层析

六、高效液相色谱

单元五离心技术

一、基本原理

二、离心机的性能及用途

三、离心方法

单元六生物大分子制备技术

一、材料的选择和预处理

二、‘细胞的破碎及细胞器的分离

三、生物大分子的提取和分离纯化

四、样品的浓缩、干燥、保存及纯度鉴定

单元七膜分离技术

一、基本原理

二、膜的性质

三、透析

四、超滤，

五、电渗析

六、纳米过滤

单元八酶联免疫技术（ELISA）

一、基本原理

二、操作要点

单元九生物化学实验项目

氨基酸及蛋白质类实验

实验一薄层层析法分离鉴定氨基酸

实验二纸层析法分离鉴定氨基酸

实验三氨基氮的测定甲醛滴定法

实验四蛋白质的沉淀反应

实验五蛋白质的两性反应和等电点测定

实验六双缩脲法测定蛋白质含量

实验七Folin-酚试剂法测定蛋白质含量

实验八考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量

实验九紫外吸收法测定蛋白质含量

实验十微量凯氏定氮法测定粗蛋白含量

实验十一乙酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质

实验十二蛋白质的脱盐技术

实验十三酪蛋白的制备

实验十四SDS-聚丙烯酰胺凝胶（CPAGE）电泳测定蛋白质相对分子质量

实验十五血清免疫球蛋白的分离纯化及鉴定

核酸类实验

实验十六动物组织DNA的提取与含量测定

实验十七酵母RNA的提取及定性定量鉴定

实验十八质粒DNA的提取

实验十九PCR基因扩增技术

实验二十DNA琼脂糖凝胶电泳

酶学实验

实验二十一温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响

实验二十二琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制

实验二十三血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定

实验二十四大蒜超氧化物歧化酶（SOD）的分离提取与活性测定

实验二十五蛋白酶活力测定

实验二十六大麦萌发前后淀粉酶活力的比较

实验二十七酶联免疫吸附法（ELISA）测定克伦特罗

实验二十八酶联免疫吸附法（ELISA）测定食品中磺胺二甲嘧啶残留

实验二十九蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法

维生素及激素类实验

实验三十维生素B2的定量测定（荧光法）

实验三十一维生素C的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）

实验三十二脂溶性维生素的测定（高效液相色谱法）

实验三十三畜禽肉中己烯雌酚残留的测定（高效液相色谱法）

糖类及叶绿素实验

实验三十四总糖和还原糖测定（3，5-二硝基水杨酸比色法）

实验三十五费林试剂热滴定法测定还原糖

实验三十六血糖的定量测定（福林-吴宪法）

实验三十七果胶的提取

实验三十八叶绿素含量的测定（分光光度法）

脂类实验

实验三十九粗脂肪的定量测定（索氏抽提法）

实验四十卵磷脂的提取及鉴定

实验四十一脂肪碘值的测定

实验四十二脂肪酸价的测定

附录

一、常用溶液浓度的单位及计算

二、标准溶液的配制与标定

三、常用缓冲溶液的配制

四、一般化学试剂的分级

五、易变质和需要特殊方法保存的试剂

六、常用市售酸、碱的浓度

七、硫酸铵饱和度常用表

八、指示剂

九、元素的相对原子质量表

十、常见蛋白质主要参数

十一、常用凝胶数据表

十二、实验室分析用水规格及标准

十三、离心机转速与相对离心力的换算图

主要参考书目

　　本教材共分9个单元，第一单元为生物技术实验要求与基本技能；第二单元至第八单元分别介绍了分光光度计术、电泳技术、层析技术、离心技术、生物大分子制备技术、膜分离技术、酶联免疫技术等的发展现状、基本原理、操作要点以及在生产实践中的应用；第九单元按照生物化学教学进程，编排了40余个实验项目，分别涵盖了糖类、蛋白质、酶、核酸、维生素和动态代谢等内容，其中包括许多生物活性物质的提取、分离、净化、制备和分析技术，可供不同学科、专业、研究测试单位选用。　　本书可作为高等院校生物技术、生物工程、动物医学、动物科学、饲料、环境、食品、卫检、制药、园林、农产品安全等相关专业的教材，也可作为相关专业人员的参考书。