基因工程与分子生物学实验教程

一、基础实验部分

实验一 植物基因组DNA的提取和酶切

实验二 动物组织总DNA的提取

实验三 大肠杆菌染色体DNA的提取

实验四 质粒DNA的提取、琼脂糖凝胶电泳鉴定和酶切

实验五 从琼脂糖中回收DNA片段

实验六 目的DNA与载体质粒的连接

实验七 大肠杆菌DH5ct感受态细胞的制备

实验八 重组质粒的转化和重组菌的筛选

实验九 多聚酶链式反应（PCR）扩增目的基因

实验十 Southern Blotting鉴定目的DNA片段

实验十一 植物中RNA的提取

实验十二 反转录及反向PCR检测特异基因的表达

实验十三 植物叶片总蛋白的提取

实验十四 蛋白质印迹

二、综合实验部分

实验十五 小片段基因组文库的构建

实验十六 目的DNA片段在基因组中存在和拷贝数的分析

实验十七 PCR克隆特异基因序列

实验十八 特异基因转录表达分析

实验十九 特异蛋白质表达分析

实验二十 GFP和HSF4的融合蛋白在Hela细胞中的定位观察

实验二十一 利用分子生物学技术鉴定细菌

三、基因芯片技术

实验二十二 利用基因芯片鉴定细菌

实验二十三 应用基因芯片研究酵母菌热激反应基因表达谱的变化

四、附录

附录1 琼脂糖凝胶电泳分离技术

附录2 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

附录3 抗原抗体反应

附录4 纯化方法

附录5 储存液的配制

附录6 DNA和RNA的定量检测

附录7 本书中采用的英文缩写

附录8 微量移液器的使用

附录9 RedPrime DNA探针标记试剂盒操作方法

参考文献

《基因工程与分子生物学实验教程》由具有丰富实验教学及科研经验的人员编写，内容精练，通俗易懂，学时安排灵活，可操作性强，适合高等学校本科实验教学使用。
全书除了附录外，共分三个部分：第一部分为基础实验，共十四个独立的实验技术，前十个实验在动物DNA、植物DNA和质粒DNA提取的基础上，进行酶切，将酶切后的基因组DNA与从琼脂糖凝胶中纯化后的载体片段进行连接，同时PCR扩增目的片段，将目的片段从琼脂糖凝胶中纯化后与T载体进行连接。后面四个实验分别提供了从RNA水平和蛋白质水平检测基因表达的方法。第二部分为综合实验，共七个综合实验，分别从不同的角度将不同的实验技术有机地整合，形成了具有一定生物学意义的大实验，不仅训练了学生的基础实验技术，也合理安排和节省了时间，同时提供了进行完整科学研究和应用操作的训练方法，可以根据使用者实验室的需要选择合适的研究性课题进行实验。第三部分是与基因芯片有关的两个创新性实验，不仅提供了前沿技术，还可以根据使用者实验室的需要结合科学研究进行创新性实验。