植物生理学实验技术教程

图版

前言

第一部分 植物细胞生理和细胞信号转导

§1 植物细胞的活体染色与细胞死活鉴定

§2 植物组织（细胞）化学染色技术

2.1 核酸的组织化学鉴定

2.1.1 孚尔根法鉴定DNA

2.1.2 甲基绿一派罗宁法鉴定DNA、RNA

2.2 酶的组织化学鉴定

2.2.1 多酚氧化酶染色法

2.2.2 细胞色素氧化酶染色法

2.2.3 酸性磷酸酯酶染色法

2.2.4 三磷酸腺苷酶染色法

2.2.5 转基因植物的口一葡萄糖苷酸酶（GUS）活性的组织化学鉴定

§3 植物细胞荧光检测技术

3.1 植物肌动蛋白细胞骨架的荧光标记

3.2 植物微管蛋白的免疫荧光染色

3.3 细胞核的荧光标记

3.4 显微注射荧光探针法研究植物细胞间的共质体通讯

§4 植物活细胞中自由钙的检测

4.1 气孔保卫细胞中游离钙浓度的测定

4.2 植物花粉管胞质游离钙浓度的测定

§5 荧光探针法测定植物细胞内pH的变化

参考文献

第二部分 植物水分生理和矿质营养

§6 压力室法测定植物组织水势

§7 溶液渗透浓度测定仪测定植物组织渗透势的方法

§8 用CB-1301型稳态气孔计测定叶片蒸腾速率和气孔导度

§9 植物叶片气孔运动的调节

§10 植物的溶液培养及缺素诊断

§11 植物根系活力的测定（TTC法）

§12 硝酸还原酶活性测定

§13 H+-ATPase活性测定

13.1 质膜H+-ATPase活性的测定

13.2 液泡膜H+-ATPase活性的测定

§14 原子吸收光谱测定植物中K+含量

§15 测定植物全细胞跨膜钾离子流的膜片钳技术

参考文献

第三部分 植物的光合作用和呼吸代谢

§16 叶绿体色素的提取和定量分析

§17 红外线CO2仪测定叶片的光合速率、呼吸速率以及CO2补偿点

§18 氧电极法测定叶片组织和分离叶绿体的光合速率和呼吸速率

18.1 绿色植物叶片组织的光合放氧速率和呼吸速率测定

18.2 分离叶绿体的光合放氧速率测定

§19 离体叶绿体的光还原反应

§20 离体线粒体的氧化作用和磷酸化作用

§21 二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶（Rubisco）羧化活性的测定

21.1 分光光度法

21.2 同位素法

§22 PEP羧化酶活性的测定

参考文献

第四部分 植物激素和次生物质检测

§23 植物激素提取和分析常识

§24 植物细胞分裂素类物质的分离提取

§25 HPLC-ELISA法测定细胞分裂素

§26 植物激素乙烯的气相色谱法测定

§27 ABA免疫组织化学定位模型实验

§28 生长素的生理效应及生物鉴定法

28.1 用芽鞘伸长法测定生长素类物质的浓度和效价

28.2 用绿豆根形成法测定生长素类物质的浓度或效价

§29 赤霉素的生物测定

§30 赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成

§31 细胞分裂素对菜豆叶片生长和衰老的效应

§32 生长素和乙烯对叶片脱落的效应

§33 分光光度法测定烟碱含量

33.1 紫外分光光度法

33.2 萃取分光光度法

参考文献

第五部分 植物生长发育及其调控

§34 叶片培养——植物组织培养中的脱分化与再分化过程

§35 植物细胞薄层培养

§36 植物细胞悬浮培养

§37 拟南芥叶肉细胞原生质体的分离、培养及应用

§38 拟南芥的遗传转化一浸蘸法

§39 日本牵牛开花的光周期诱导与成花信号转移

§40 植物成花刺激物的传递

§41 花粉萌发和花粉活力的测定

41.1 花粉萌发的测定

41.2 花粉活力的测定

41.2.1 TTC显色法

41.2.2 I2-KI染色测定法

41.2.3 过氧化物酶法

§42 种子生活力测定

42.1 溴麝香草酚蓝（BTB）法

42.2 氯化三苯基四氮唑（TTC）法

42.3 红墨水染色法

42.4 荧光法

§43 种子萌发的调控

43.1 光质对种子萌发的影响

43.2 外源植物激素对种子萌发的影响

§44 拟南芥发育缺陷突变体mt50的表型观察

参考文献

第六部分 植物逆境生理

§45 植物游离脯氨酸含量的测定

§46 甜菜碱含量测定

§47 植物保护酶（SOD，POD，CAT）活性测定

47.1 SOD活性测定——NBT法

47.2 过氧化氢酶活性的测定

47.3 过氧化物酶活性的测定

§48 H2O2含量的测定和组化定位检测

48.1 H2O2含量的测定

48.1.1 分光光度计法

48.1.2 荧光分光光度计法

48.2 过氧化氢组化定位检测——DAB染色法

§49 植物组织中丙二醛含量测定

§50 电导仪法测定植物细胞质膜透性

§51 盐胁迫对拟南芥盐敏感突变体生长的影响

§52 RD29A-GUS转基因植物在非生物胁迫下的基因表达分析

§53 植物组织电阻和电位的测定

参考文献

附录

一、取样及植物材料处理的原则

二、计量单位

三、常用缓冲液

四、常用植物生长调节物质主要性质

五、组织培养常用培养基配方

参考文献

《植物生理学实验技术教程》包括植物生理学的主要研究内容。分为细胞生理和细胞信号转导、水分生理和矿质营养、光合作用和呼吸代谢、植物激素和次生物质、植物生长发育调控、植物逆境生理等几部分。每部分较全面介绍相关研究技术和扩展知识；列出的实验既有基本常用的实验，又有较新的、重要的研究技术，部分实验提出研究思路，有学生自主设计的空间，启迪学生创新性，体现了植物生理学教学、研究工作的特色。实验介绍有详有略；每个实验都提出讨论的问题；附主要的原始参考文献。书后还列出缓冲液、计量单位等附录表；插入了主要仪器装置和重要实验结果的彩图。

　　《植物生理学实验技术教程》既适于生物科学、农业科学本科生使用，也适于植物相关专业研究生参考。全书由中国农业大学生物学院植物科学系老师参加编写。