生物化学与分子生物学实验技术

第一部分生物化学与分子生物学实验基本知识

第一节生物化学与分子生物学实验室规则

第二节生物化学实验的基本操作

第二部分生物化学与分子生物学实验原理与技术

第一节分光光度法

第二节离心技术

第三节层析技术

第四节电泳

第五节分子克隆

第六节聚合酶链式反应(PCR)

第七节核酸分子杂交技术

第三部分生物化学与分子生物学实验

第一节生物化学基本实验

实验1双缩脲法测定蛋白质浓度

实验2Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度

实验3考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量

实验4紫外分光光度法测定蛋白质

实验5血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳

实验6预染血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳

实验7聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶

实验8SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)

实验9等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

实验10影响酶活性的因素

实验11蔗糖酶的专一性

实验12底物浓度对酶促反应速度的影响过氧化氢酶K的测定

实验13抑制剂对酶促反应速度的影响

实验14血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性测定(赖氏法)

实验15血清甘油三酯含量的测定-乙酰丙酮法

实验16血浆高密度脂蛋白(HDL)-胆固醇含量的测定

实验17酮体的生成

实验18运动对全血乳酸含量的影响

第二节生物化学综合实验

实验19激素对血糖浓度的影响

实验20血清γ-球蛋白的分离与纯度鉴定

实验21血清清蛋白的分离及电泳鉴定

实验22核酸的分离提取、成分鉴定及含量测定

第三节分子生物学实验

实验23大肠杆菌感受态细胞制备及外源DNA的转化

实验24质粒DNA的提取

实验25质粒DNA的限制性内切酶酶切

实验26DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验27PCR基因扩增

实验28Southern杂交分析

实验29Northern杂交分析

附录

附录Ⅰ化学试剂分级及注意事项

附录Ⅱ常用缓冲液配制方法

附录Ⅲ重铬酸洗液的配制与再生

参考文献

　　本教材是以培养学生学习生物化学与分子生物学实验技能为主要目的的实验指导书。遵循先理论后实践的原则，编写的宗旨为简明、实用。作者以实验教学改革为指导，加强了生物化学基本技能训练和综合性实验。全书分为三大部分：第一部分简要介绍生物化学实验的基本知识；第二部分为生物化学与分子生物学基本实验原理和技术，其中包括分光光度技术、离心技术、层析技术、电泳技术和其他分子生物学基本技术；第三部分为生物化学与分子生物学实验。附录列出常用生物化学试剂的配制方法，可供有关人员查阅参考。本实验指导主要是为配合基础生物化学教材而编写，所涉及的技术面比较广泛，可供临床医学、医学检验、影像学、预防医学、生物科学、生物技术等相关学科本科学生使用。　　本书是以现代生物化学和分子生物学的基础知识为主体而编写的实验指导教材。在实验教学改革的指导下，弱化了一些传统的验证性试验，着重训练学生的动手能力和科研思维的形成，提高学生的专业素养以及在考研、就业中的竞争力。　　全书共分为三部分，前两部分侧重于理论，第三部分为实验部分。在理论部分，介绍了生物化学和分子生物学的基本知识，常用实验技术及其原理，使得学生在开始实验前能够对实验涉及的技术有一个理论层面的认识。第三部分精选了29个实验，覆盖面广，使得学生能够全面掌握常用的生物化学与分子生物学实验技术，各学校可以酌情选用。附录中包括了常用生物化学试剂的配制方法。　　本书适合临床医学、医学检验、影像学、预防医学、生物科学、生物技术等相关学科的本科学生使用。