基础生物化学实验

第一篇 常用生物化学实验技术及原理

第一章 层析技术

第二章 电泳技术

第三章 光谱技术

第四章 离心技术

第五章 膜技术及其在生物化学中的应用

第六章 蛋白质的分离纯化和检测

第七章 蛋白质的分析技术

第八章 临床生物化学检验

第二篇 学生实验

第九章 糖类的化学

实验一 糖类的性质实验（一）——糖类的颜色反应

Ⅰ.α-萘酚反应（Molisch反应）

Ⅱ.间苯二酚反应（Seliwanoff反应）

实验二 糖类的性质实验（二）——糖类的还原作用

实验三 总糖的测定——蒽酮比色法

实验四 还原糖的测定——3，5-二硝基水杨酸比色法

实验五 血糖的定量测定——GOD-PAP法

第十章 脂质的化学

实验六 粗脂肪的提取和定量测定

实验七 脂肪碘值的测定

实验八 血清胆固醇的测定

Ⅰ.化学比色法——磷硫铁法

Ⅱ.化学比色法——邻苯二甲醛法

Ⅲ.酶法

第十一章 蛋白质的化学

实验九 总氮量的测定——凯氏（Micro-Kjeldahl）定氮法

实验十 氨基酸的分离鉴定一一纸层析法

实验十一 蛋白质的性质实验（一）一一蛋白质及氨基酸的呈色反应

Ⅰ.双缩脲反应

Ⅱ.茚三酮反应

Ⅲ.黄色反应

Ⅳ.考马斯亮蓝反应

实验十二 蛋白质的性质实验（二）——蛋白质等电点的测定和蛋白质的沉淀反应

Ⅰ.蛋白质等电点的测定

Ⅱ.蛋白质的沉淀与变性

Ⅲ.尿蛋白定性检验

实验十三 蛋白质相对分子质量的测定（一）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验十四 蛋白质相对分子质量的测定（二）——凝胶过滤法

实验十五 蛋白质浓度的测定

Ⅰ.考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质的浓度

Ⅱ.用福林一酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质的浓度

实验十六 酪蛋白的制备

第十二章 核酸的化学

实验十七 大肠杆菌质粒DNA的提取、酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定

实验十八 肝细胞核中核酸（RNA和DNA）的分离与测定

实验十九 薄层层析法分离AMP、ADP和ATP

实验二十 紫外分光光度法测定核酸含量

实验二十一 应用PCR技术扩增DNA分子

第十三章 酶和维生素

实验二十二 酶的特性

Ⅰ.温度对酶活力的影响

Ⅱ.pH对酶活力的影响

Ⅲ.唾液淀粉酶的活化和抑制

Ⅳ.酶的专一性

实验二十三 枯草杆菌蛋白酶活力测定

实验二十四 底物浓度对酶促反应速率的影响——米氏常数的测定

实验二十五 胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定

实验二十六 维生素C的定量测定

Ⅰ.2，4-二硝基苯肼法

Ⅱ.荧光法

实验二十七 维生素A的定量测定

Ⅰ.三氯化锑法

Ⅱ.紫外分光光度法

第十四章 新陈代谢

实验二十八 肌糖原的酵解作用

实验二十九 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较

实验三十发 酵过程中无机磷的利用

实验三十一 脂肪酸的β-氧化

实验三十二 血液中转氨酶活力的测定

实验三十三 组织中乳酸脱氢酶同工酶的活性染色

第十五章 综合实验

实验三十四 碱性磷酸酶的分离纯化及其特性研究

Ⅰ.碱性磷酸酶的分离纯化及各级分

酶活性和蛋白含量的测定

Ⅱ.碱性磷酸酶的纯度、蛋白印迹鉴定及其亚基相对分子质量测定

Ⅲ.碱性磷酸酶的酶学特性研究

实验三十五 溶菌酶的提取和系列性质测定

Ⅰ.溶菌酶的分离纯化

Ⅱ.溶菌酶分离纯化参数的测定

Ⅲ.SDS-PAGE鉴定纯化产物的纯度和测定溶菌酶的相对分子质量

Ⅳ.溶菌酶的酶学特性研究

Ⅴ.分子筛层析测酶相对分子质量

附录

一、实验室基本操作

二、试剂的配制及其分级

三、实验误差的统计学处理

四、硫酸铵饱和度计算表

五、常用核酸、蛋白质换算数据

六、氨基酸符号及相应密码子

七、常见酸碱试剂的浓度及密度

八、常用缓冲液的配制

九、常用酸碱指示剂

十、离心机转速与相对离心力的换算

十一、层析中常用介质的规格及性能

参考文献

分实验理论和学生实验两个部分。实验理论部分涉及最基本的实验技术及原理和实验方法的介绍。学生实验部分选用包括糖类、脂质、蛋白质、核酸、酶、代谢中最基本的实验和一些训练生物化学基本技术和基本方法的实验及综合实验。书后附有实验室基本操作、常用仪器的使用方法、常用试剂的配制等附录。
第3版精简或删除了一些目前已不常用的方法介绍和实验。增加了近年发展起来的生物化学新技术、新方法和新仪器，以及一些与现代科学研究、医学、农林等应用密切相关的新实验。并增加了一些综合设计实验。在实验编写风格方面，更突出基础、简明、实用、系统。对实验中应注意的地方、学生在实验过程中易出现的问题、加入关键试剂应有的正常现象、部分仪器的正确操作等都加强了提示和指导。