分子生物学实验技术

第一章 核酸的分离与纯化

第一节 核酸分离与纯化的技术路线与原则

第二节 DNA的分离制备

第三节 质粒的分离与纯化

第四节 RNA的分离制备

第五节 实验方法

实验一 真核细胞染色体DNA的制备

实验二 细菌的培养、保存和收集

实验三 质粒DNA的提取

实验四 组织和细胞总RNA提取（TRIzol法）

实验五 核酸的定量

第二章 蛋白质的分离与纯化

第一节 生物材料的前处理

第二节 蛋白质分离与纯化的方法

第三节 蛋白质的鉴定

第四节 实验方法

实验一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量

实验二 Western印迹法检测表达蛋白

实验三 免疫荧光法检测重组蛋白

第三章 电泳技术

第一节 概述

第二节 电泳基本原理

第三节 影响电泳迁移率的因素

第四节 核酸电泳的指示剂与染色剂

第五节 不同波长紫外线对EB-DNA复合物的影响

第六节 实验方法

实验一 琼脂糖凝胶电泳法检测DNA

实验二 DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳

第四章 DNA重组技术

第一节 DNA限制性内切酶酶切技术

第二节 DNA重组方法

第三节 质粒的转化与细胞转染的方法

第四节 DNA重组体的筛选与鉴定

第五节 克隆化基因的表达

第六节 实验方法

实验一 DNA限制性内切酶消化法

实验二 DNA分子的体外连接

实验三 感受态细胞的制备

实验四 细菌的转化

实验五 重组质粒的α互补筛选

第五章 核酸分子杂交

第一节 核酸分子杂交基本原理及分类

第二节 核酸分子杂交的基本方法

第三节 探针的种类及标记

第四节 核酸分子杂交

第五节 杂交信号的检测

第六节 实验方法

实验一 地高辛标记DNA探针

实验二 放射性核素32P随机引物延伸标记法

实验三 Souther印迹杂交检测HBV-DNA

实验四 Northern印迹杂交检测HCV-RNA

第六章 聚合酶链反应（PCR）技术

第一节 PCR的反应体系

第二节 PCR的基本步骤

第三节 PCR的衍生技术

第四节 PCR技术在医学上的应用

第五节 实验方法

实验一 PCR检测病原体（试剂盒法）

实验二 PCR检测遗传疾病的相关基因

实验三 RT-PCR检测基因的表达

第七章 蛋白质组学研究技术

第一节 蛋白质组学概论

第二节 细胞及亚细胞样品制备方法

第三节 双向电泳技术

第四节 蛋白质鉴定技术

第五节 实验方法

实验一 大肠埃希菌双向凝胶电泳图谱的建立

实验二 真核酵母细胞双向图谱的建立

第八章 生物芯片技术与应用

第一节 生物芯片技术原理

第二节 芯片的构建及操作流程

第三节 芯片技术的应用

第九章 细胞凋亡与检测技术

第一节 细胞凋亡概述

第二节 凋亡细胞的形态和生化特征及检测方法

第三节 流式细胞术在细胞凋亡研究中的应用

附录一 分子生物学实验室常用仪器的使用方法与保养

附录二 实验用玻璃器皿的准备

附录三 常用缓冲液的配制

附录四 常用单位的换算

附录五 常用DNA分子量标准参照物

附录六 与DNA凝胶电泳有关的数据

《分子生物学实验技术》深入浅出地介绍了分子生物学相关技术的理论基础，同时每个章节后编有与技术理论相关的实验方法，详细介绍了实验原理，试剂的配制，所需仪器、材料，操作步骤及注意事项。在满足基本教学需要的基础上，扩展了蛋白质组学、基因芯片及流式细胞等前沿技术。
《分子生物学实验技术》具有较强的实用性和针对性，可以满足医学院校本科生及研究生的教学需要，同时也可作为广大实验人员的参考书。

《分子生物学实验技术》共由核酸的分离与纯化、蛋白质的分离与纯化、电泳技术、DNA重组技术、核酸分子杂交技术、PCR技术、蛋白质组学研究技术、生物芯片技术、细胞凋亡与检测技术以及附录十部分内容组成，以核酸的分离与纯化、DNA重组技术、PCR技术为核心，深入浅出地介绍了各相关技术的理论基础，同时每个章节后编有与技术理论相关的实验方法，详细介绍了实验原理，试剂的配制，所需仪器、材料，操作步骤及注意事项。在满足基本教学需要的基础上，扩展了蛋白质组学、基因芯片及流式细胞等前沿技术，从知识的深度和广度上来满足不同层次学生的需要。此外，在附录中详细介绍了PCR扩增仪、电泳仪、电子天平等分子生物学常用仪器的使用方法和注意事项，常用缓冲液的配制方法及与凝胶电泳相关的一系列数据，为初学者快速提高动手能力奠定了良好的基础。