生物化学与分子生物学实验

第一篇基本实验操作及常用仪器使用

第1章生物化学常用研究技术

第2章分子生物学常用研究技术

第3章基本实验操作

第4章常用仪器使用

第5章实验室规则及安全防护

第6章如何撰写实验报告

第二篇经典验证性实验

第1章蛋白质定量分析实验

实验一双缩脲法测定血清蛋白质含量

实验二Folin_酚试剂法测定蛋白质含量

实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度

实验四考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度

实验五BCA法测定蛋白质浓度

第2章层析实验

实验六纸层析法观察转氨基作用

实验七葡聚糖凝胶柱层析分离血红蛋白与鱼精蛋白

实验八离子交换层析分离混合氨基酸

实验九薄层层析分离鉴定氨基酸

第3章电泳实验

实验十血清醋酸纤维薄膜电泳

实验十一聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶

实验十二SDS-PAGE测定蛋白质的分子量

第4章酶学实验

实验十三血清碱性磷酸酶活性测定

实验十四血清丙氨酸氨基转移酶活性测定

实验十五胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素

实验十六丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用

实验十七酶的非竞争性抑制作用

实验十八酶米氏常数的测定

第5章糖类与脂类

实验十九血糖浓度的测定

实验二十肾上腺素对血糖浓度的影响

实验二十一血清三酰甘油浓度测定

实验二十二血清总胆固醇浓度测定

实验二十三血清载脂蛋白apoA1的测定

第6章核酸分离纯化技术

实验二十四基因组DNA的提取制备与检测

实验二十五总RNA的提取制备与检测

实验二十六质粒DNA的提取制备与检测

第7章PCR技术

实验二十七常规PCR技术

实验二十八定量PCR技术

第8章分子克隆技术

实验二十九DNA的限制性酶切与电泳

实验三十凝胶中DNA片断的纯化回收

实验三十一DNA连接实验

实验三十二感受态细胞的制备

实验三十三重组DNA转化与蓝白斑筛选

第9章分子杂交技术

实验三十四Southern印迹杂交

实验三十五Northern印迹杂交

实验三十六Western印迹

实验三十七核酸原位杂交

附核酸分子探针的标记

第三篇综合性实验

实验一血清7球蛋白的分离纯化与鉴定

实验二碱性磷酸酶的分离纯化与动力学研究

实验三hCS在大肠埃希菌中的表达、纯化与鉴定

实验四hCS基因在毕赤酵母中的表达及鉴定

实验五荧光原位杂交实验

实验六双脱氧链末端合成终止法测定DNA序列

实验七肽或蛋白质N一端氨基酸序列测定

实验八用双荧光素酶报告基因检测启动子活性

实验九电泳迁移阻滞实验

实验十染色质免疫沉淀

实验十一蛋白质双向电泳

实验十二酵母双杂交实验

实验十三RNA干扰实验

第四篇创新性实验

实验一重要蛋白质或酶的分离纯化

实验二糖尿病的生化及遗传检测分析实验

实验三家族性高胆固醇血症的诊断

实验四血友病的分子诊断

实验五RNA干扰技术靶向沉默目的基因

　　本教材一共分为四篇。第一篇是基本实验操作及常用仪器使用，重点介绍了一些目前常用的生物化学与分子生物学研究技术和常用仪器的使用方法以及基本的实验操作要求，目的在于使学生对生物化学与分子生物学的研究技术有一个系统的认识。第二篇是经典验证性实验，开设了一些经典的生物化学与分子生物学实验，这些实验均经过长期的实验教学实践，证明有助于学生巩固理论知识和培养学生基本的实验操作能力。第三篇是综合性实验，每个实验均涉及多种实验技术的使用，通过相对系统地使用多种实验技术来解决一个问题或达到一个研究目的，以培养学生的综合性逻辑思维能力，对科学研究有一个初步的认识。第四篇是创新性实验，通过由学生自己提出问题、解决问题的方式，以培养学生独立思考和基本的科研能力。本教材不仅适合医学院校临床医学等各专业五年制、七年制和研究生学生使用，而且也可供相关专业的科研、教学和技术人员参考。　　本教材是为适应高等医学院校基础医学实验教学改革和发展的需要而编写的一本生物化学与分子生物学实验教材。本教材分为基本实验操作及常用仪器使用、经典验证性实验、综合性实验和创新性实验共四篇。在基础理论知识方面，对生物化学与分子生物学的经典研究技术、基本实验操作和常用仪器使用均进行了详细介绍。在实验项目设置上，包括蛋白质定量、层析、电泳、酶学、糖类与脂类、核酸分离纯化、PCR、分子克隆、分子杂交以及RNA干扰、双向电泳、EMSA和ChIP等经典验证性实验、综合性实验和创新性实验。教材内容新颖，体系完整，有所侧重，便于选择。　　本教材可供医学院校临床医学等各专业五年制、七年制和研究生学生使用，也可供相关专业的科研、教学和技术人员参考。