转录因子实用技术

1 DNA迁移率变动分析 1.1 概述 1.2 DNA结合蛋白的检测 1.2.1 DNA迁移率变动分析的应用 1.2.2 DNA探针的选择 1.2.3 用于阻滞分析的标记寡核苷酸探针的制备 1.2.4 限制性片段探针的标记 1.2.5 蛋白提取物的制备 1.2.6 结合反应 1.2.7 少量提取物的制备 1.3 用于结合分析的蛋白质的其他来源 1.3.1 在细菌中表达DNA结合蛋白 1.3.2 用哺乳动物细胞表达蛋白 1.3.3 体外转录和翻译——体外表达 134 用杆状病毒系统表达转录因子

1 DNA迁移率变动分析 1.1 概述 1.2 DNA结合蛋白的检测 1.2.1 DNA迁移率变动分析的应用 1.2.2 DNA探针的选择 1.2.3 用于阻滞分析的标记寡核苷酸探针的制备 1.2.4 限制性片段探针的标记 1.2.5 蛋白提取物的制备 1.2.6 结合反应 1.2.7 少量提取物的制备 1.3 用于结合分析的蛋白质的其他来源 1.3.1 在细菌中表达DNA结合蛋白 1.3.2 用哺乳动物细胞表达蛋白 1.3.3 体外转录和翻译——体外表达 134 用杆状病毒系统表达转录因子 1.3.5 转录因子蛋白的纯化 1.4 DNA结合特性的分析 1.5 DNA结合蛋白的特性 1.5.1 抗体的添加 1.5.2 潜在配基的添加 1.5.3 酶解剪除后的带变动分析 1.6 蛋白—蛋白相互作用的分析 1.7 结论2 DNA—蛋白质复合体体合和体内足迹分析 2.1 概述 2.2 体外足迹分析 2.2.1 以结合位点碱基级分辨率对32P末端标记的片段进行分析 2.2.2 在闭合环状质粒上的结合分析 2.3 体内足迹分析 2.3.1 体内DNA修饰 ……3 体外转录和转录因子的特征4 DNA结合转录因子的纯化及克隆5 用cDNA表达文库克隆转录因子6 由序列相似性克隆转录因子7 采用结合位点克隆技术鉴定转录因子的靶基因8 克隆的转录因子的分析9 利用鼠脑细胞核提取物体外转录分析神经元启动子10 用于转录研究的染色质模板的制备11 转录因子修饰分析附录 常用缩略词

本书是英国牛津大学出版社出版的实验技术丛书中《Transcription Factors: A Practical Approach》第2版的中译本。全书共分为11章，详细介绍了研究真核生物转录因子的实用技术，内容包括用cD-NA表达文库，序列相似克隆转录因子，用基因位点克隆技术确定转录因子的靶基因，转录因子的纯化及特征分析，DNA迁移率变动分析，DNA-蛋白质复合体外足迹分析以及转录因子的修饰分析等。本书可供分子生物学、生物化学、生物技术、医药卫生以及农林等领域对转录调控感兴趣的师生及科研人员参考。