实用流式细胞分析技术

第一章 流式细胞分析技术原理

第一节 流式细胞仪的组成部件和工作原理

一、流式细胞仪的组成部件

二、流式细胞仪的工作原理

第二节 流式细胞分析技术的相关概念

二、前向散射与侧向散射

二、荧光信号

三、流式通道

四、流式图

五、光谱重叠与荧光补偿

第三节 流式细胞分析技术的基本原理

一、阈值设定

二：光电倍增管电压设定

三、补偿调节

四、门与设门

五、分析原理

第二章 流式细胞分析标本处理

第一节 流式细胞分析标本来源与制备

一、外周血标本

二、骨髓标本

三、实体瘤组织标本

四、脱落细胞标本

五、培养细胞标本

第二节 流式细胞分析对照的设置

一、阴性对照的设置

二、阳性对照的设置

三、空白对照的设置

四、补偿对照的设置

第三节 流式细胞分析标记抗体的选择

一、荧光染料

二、荧光抗体

三、荧光抗体的选择

四、荧光抗体滴度的选择

第三章 流式细胞分析仪操作规程

第一节 FACSCalibur流式细胞仪的操作规程

一、开机

二、校准

三、运行软件

四、样品检测

五、关机

六、仪器保养

七、数据分析

第二节 FACSCantoⅡ流式细胞仪的操作规程

一、开机

二、校准

三、FACSCanto Clinical六色免洗淋巴细胞亚群检测及HLA-B27分析

四、BD FACSDiva软件进行多色获取和分析

五、关机

六、仪器保养

第四章 急性白血病免疫分型及应用

第一节 急性白血病诊断及分型

一、急性白血病的FAB分型

二、急性白血病的MIC分型

三、急性白血病2008版WHO分类

第二节 正常骨髓造血细胞分化发育的抗原表达规律

一、正常粒系细胞和单核系细胞的抗原表达规律

二、正常红系细胞的抗原表达规律

三、正常巨核细胞的抗原表达规律

四、正常B淋巴细胞的抗原表达规律

五、正常T淋巴细胞的抗原表达规律

第三节 急性白血病免疫分型的基本原理及检测方法

一、急性白血病免疫分型的基本原理

二、急性白血病免疫分型的检测方法

三、样本

四、细胞标记

五、流式细胞仪检测

六、数据分析及结果解读

七、临床意义

第四节 急性髓系白血病的免疫表型

一、急性髓系白血病伴重现性细胞遗传学异常

二、急性髓系白血病（非特指）

三、原始浆细胞样树突细胞肿瘤

第五节 急性淋巴细胞白血病的免疫表型

一、B淋巴母细胞白血病／淋巴瘤

二、T淋巴母细胞白血病／淋巴瘤

第六节 急性系列不明型白血病的免疫表型

一、急性未分化型白血病

二、混合表型急性白血病伴t（9；22）（q34；q112）；BCR-ABL1

三、混合表型急性白血病伴t（v；11q23）；MLL重排

四、混合表型急性白血病，B／髓，非特殊类型

五、混合表型急性白血病，T／髓，非特殊类型

六、NK细胞淋巴母细胞白血病／淋巴瘤

第七节 流式细胞术检测急性白血病微小残留

一、流式细胞术检测微小残留病的方法学特点

二、流式细胞术检测微小残留病的方法

三、微小残留病检测的临床应用

第五章 淋巴细胞增殖性肿瘤的免疫分型及应用

第一节 淋巴细胞增殖性肿瘤流式免疫分型的检测方法

一、主要仪器

二、主要试剂

三、样本

四、细胞标记

五、流式细胞仪检测

六、数据分析及结果解读

第二节 成熟B细胞肿瘤

一、2008版WHO对成熟B细胞肿瘤的分类

二、成熟B细胞肿瘤免疫表型分析的基本思路及策略

三、常见的成熟B细胞肿瘤的免疫表型

第三节 成熟T／NK细胞肿瘤

一、2008版WHO对成熟T／NK细胞肿瘤的分类

二、成熟T／NK细胞肿瘤免疫表型分析的基本思路及策略

三、常见的成熟T／NK细胞肿瘤的免疫表型

第六章 多发性骨髓瘤免疫分型及应用

第一节 多发性骨髓瘤概述及流式细胞术免疫分型的应用

第二节 多发性骨髓瘤免疫分型

一、多发性骨髓瘤FCM检测样本的制备

二、多发性骨髓瘤FCM检测

三、多发性骨髓瘤FcM免疫表型

第三节 多发性骨髓瘤微量残留病流式细胞术检测

一、流式细胞术检测MM微小残留病变

二、MRD FCM检测注意事项

三、与其他MRD检测方法的比较

第四节 多发性骨髓瘤免疫表型流式细胞术检测结果评估

一、浆细胞比例问题

二、恶性浆细胞病的临床分类问题

第七章 细胞凋亡的检测与应用

第一节 细胞凋亡

一、细胞凋亡概述

二、细胞凋亡的生物学特征

三、细胞凋亡发生过程与机制

四、细胞凋亡研究意义

第二节 细胞凋亡的流式细胞术检测方法

一、活化的caspase 3检测法

二、Annexin-V／PI或Annexin-V／7-AAD法

三、JC-1法、Apo27法（线粒体跨膜电位检测法）

四、TUNEL法（原位末端转移酶标记法）

五、DNA含量分析法

六、SYTO／PI双染色法

七、细胞凋亡相关基因蛋白的流式细胞术检测

第三节 细胞凋亡在医学研究中的应用

一、细胞凋亡与疾病发生密切相关

二、调节 细胞凋亡治疗疾病

第四节 细胞凋亡研究进展

第八章 细胞免疫功能分析与应用

第一节 淋巴细胞及其亚群分析

一、淋巴细胞发育及其亚群分类

二、淋巴细胞免疫表型分析

第二节 淋巴细胞几种常见功能亚群分析

一、辅助性T细胞和诱导性T细胞

二、调节 性T细胞

三、细胞毒性T细胞和抑制性T细胞

四、初始T细胞和记忆T细胞

五、活化T细胞

第三节 机体免疫功能监测的质量控制

第九章 细胞因子的检测与应用

第一节 细胞因子的基本概念与应用

一、基本概念

二、临床应用

第二节 检测方法

一、胞内染色法

二、液相芯片技术与BD流式微球阵列分析

三、方法学评价

第十章 PNH阳性克隆的筛查与应用

第一节 基于CD55和CD59分子表达的PNH筛查方法

一、白细胞表面CD55和CD59分子的测定

二、红细胞表面CD55和CD59分子的测定

第二节 基于FLAER的PNH筛查方法

第三节 流式诊断和监测PNH及相关疾病的指南

一、PNH实验的临床指征

二、流式细胞术检测PNH

第十一章 HLA-B27的流式检测与应用

第一节 概述

第二节 HLA-B27检测方法

一、补体依赖性微量淋巴细胞毒法（CDMA）

二、酶联免疫测定试验（ELISA）

三、引物特异性聚合酶链反应（SSP-PCR）

四、流式细胞术（FCM）法

第三节 HLA-B27检测的临床应用

一、HLA-B27检测在AS诊断中的应用价值

二、HLA-B27在其他脊柱关节 病中的应用

三、HLA-B27在急性葡萄膜炎中的应用

四、HLA-B27与感染性疾病的关系

第十二章 造血干细胞的流式分析及应用

第一节 概述

一、造血干细胞概念

二、造血干细胞的生物学特性

第二节 造血干细胞检测方法

一、动物体内重建实验

二、体外克隆形成实验

三、造血干细胞表面标志测定

第三节 造血干细胞的计数

一、ISHACE法检测CD34+细胞

二、ProCOUNT造血干细胞计数

第四节 造血干细胞的临床应用

一、造血干细胞移植

二、造血干细胞可作为基因治疗的靶细胞

附录 常用溶液的配置

《实用流式细胞分析技术》介绍了流式细胞术的分析原理、标本处理、临床常用流式细胞分析仪的操作程序，以及目前国内流式细胞术实验室常规开展检测项目的原理、操作方法及临床意义，包括淋巴细胞亚群分析、淋巴造血系统肿瘤的免疫分型、HLA—B27的流式检测、PNH阳性克隆的筛查、细胞因子的检测、造血干细胞的流式分析以及细胞凋亡的检测等。
　　《实用流式细胞分析技术》内容全面、务实，理论联系实际。编者们在查阅国内外文献的基础上，结合各自在临床工作中的经验体会，对相关内容进行了很好的诠释。同时配以大量的临床图例，便于读者更好地学习理解。
　　《实用流式细胞分析技术》不仅适用于从事临床流式细胞术应用的专业人员，而且可用于检验医学专业人员、临床医生和医学研究人员的教学、科研和继续教育等工作。