酶学实验手册

1引言

2酶命名

3酶反应

3.1酶反应理论

3.1.1反应级数

3.2米氏方程

3.3酶测定理论

3.3.1反应曲线分析

3.3.2如何进行酶测定

3.3.3酶活力

3.4偶联酶反应理论

3.4.1双偶联酶反应

3.4.2三偶联酶反应

3.5底物测定

3.5.1终点法

3.5.2偶联酶反应

3.5.3动力学方法测定底物

3.5.4酶的循环

3.6仪器方面

3.6.1分光光度法

3.6.2电化学方法

3.6.3释放或消耗气体的反应的分析

3.7酶的测定

3.7.1总论

3.7.2应用方面

3.7.3缓冲液和溶液

3.7.4氧化还原酶测定

3.7.5丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)

3.7.6α－酮戊二酸脱氢酶复合体(OGDHC)

3.7.7转移酶

3.7.8水解酶

3.7.9蛋白酶

3.7.10裂解酶

3.7.11异构酶

3.7.12由酶循环确定烟酰胺核苷酸

3.8多种方法

3.8.1蛋白质测定

3.8.2磷酸测定

3.8.3酶溶液浓缩

3.9酶免疫测定

3.9.1非竞争固相酶免疫测定

3.9.2竞争固相酶免疫测定

3.9.3酶免疫测定方法

4结合测定

4.1不可逆结合、可逆结合、特异性结合和非特异性结合

4.1.1总论

4.1.2实验

4.2根据大小不同进行结合测定

4.2.1超滤

4.2.2平衡透析

4.2.3结合测定的计算

4.2.4凝胶过滤

4.2.5超离心

4.3分光光度技术

4.3.1示差分光光度法

4.3.2荧光分光光度法

4.4结合测定的其他方法

4.4.1放射性标记

4.4.2反射计干涉分光光度法

5酶的技术应用

5.1酶固定化原理

5.1.1吸附

5.1.2包埋

5.1.3微囊法

5.1.4交联

5.1.5共价结合到固体支持物

5.2酶固定化方法

5.2.1微胶囊化尼龙珠

5.2.2丙烯酰胺包埋

5.2.3酶在非孔玻璃表面的共价固定化

5.2.4可调孔玻璃的固定化

5.2.5共价固定化酶到聚酰胺

5.2.6用三乙基氧四氟硼酸的烷基化

5.2.7聚酰胺部分水解后固定化酶到氨基

5.2.8聚酰胺部分水解后固定化酶到羧基

5.2.9固定化酶到聚酯

5.2.10用碱水解和氯甲苯活化的固定化

5.2.11碱水解和由二吲哚碳酰的活化

5.3固定化酶的分析

5.3.1蛋白质测定

5.3.2酶测定

5.4酶反应器

5.4.1批式反应器(搅拌罐式反应器)

5.4.2膜式反应器

5.4.3固体床式反应器

5.4.4固定化细胞

5.5生物传感器

5.5.1酶电极

5.5.2免疫电极

5.5.3其他生物传感器

5.5.4生物亲和传感器

5.6固定化酶与治疗

附录酶的EC号列表

索引

　　本书既包括酶反应、酶测定的基本理论，又包含酶的实验室操作、技术应用和测定仪器等实用性内容，最大的特点是列出了大约60种不同的酶的具体测定方法，同时还有蛋白质结合和固定化酶的测定方法，是一本实用性非常强的实验室酶学手册。　　本书介绍了酶学中的实验方法，内容涉及酶反应、酶测定的基本理论、酶的实验室操作、酶的技术应用和测定仪器等实用性很强的内容，是一本可操作性很强的实验室酶学手册。在内容编排上体现了下列特色：　　列出了大约60种不同的酶的具体测定方法；　　详细介绍了蛋白质结合和固定化酶的测定方法。　　作者HansBisswanger教授一直从事于酶学领域的研究而且有着几十年的教学经验，他在总结教学实践和科学研究的基础上写成本书。本书可供生物化学、分子生物学、发育生物学、生物工程等领域的研究生和高年级本科生阅读，也可供上述领域研究人员参考。