组织和细胞培养技术

第一章 绪论

第一节 组织培养的诞生与发展简史

第二节 组织培养的优点、局限性及发展方向

一、组织培养的优点

二、组织培养的局限性

三、组织培养的可能发展方向

第三节 组织培养常用术语

第四节 组织培养常用缩写词

第二章 细胞培养的基本条件

第一节 细胞培养实验室的建立

一、实验室设计原则与要求

二、实验室的布局

三、细胞培养实验室的基本设备

第二节 培养仪器和材料

一、常用仪器设备

二、培养器皿与其他材料

三、培养用品的清洗和消毒

第三节 培养用液

一、培养基

二、其他培养用液

三、细胞培养所用液体的灭菌与保存

第三章 细胞培养的基本技术

第一节 显微镜观察

一、相差显微镜

二、微分干涉差显微镜技术

三、荧光显微镜

四、激光共聚焦扫描显微镜

五、电子显微镜

第二节 流式细胞仪技术

第四章 体外培养的基本组织

第一节 上皮组织

一、内皮细胞的培养

二、单层柱状上皮细胞的培养

三、假复层纤毛柱状上皮细胞的培养

四、复层扁平上皮细胞的培养

第二节 结缔组织

一、成纤维细胞的培养

二、巨噬细胞的培养

三、脂肪细胞的培养

四、肥大细胞的培养

五、血细胞的培养

六、淋巴细胞的培养

七、软骨细胞的培养

八、骨细胞的培养

第三节 肌组织

一、心肌细胞的培养

二、平滑肌细胞的培养

三、骨骼肌细胞的培养

第四节 神经组织

一、神经元的培养

二、神经胶质细胞的培养

第五节 细胞运动的观察

一、噬动轨迹法

二、细胞刮除法

三、细胞培养池法

四、数字影像法

第六节 细胞培养的生长测定

一、细胞计数法

二、台盼蓝染色法

三、MTT比色法

四、细胞生长曲线法

五、[3H]-TdR掺入法

六、BrdU掺入法

第七节 细胞的冻存、复苏和运输

一、细胞的冻存

二、细胞的复苏

三、细胞的运输

第五章 细胞系的建立和鉴定

第一节 正常细胞系的建立和鉴定

一、正常细胞系建立

二、正常细胞系建立的例证

三、建立正常细胞系的讨论和小结

四、正常细胞系的鉴定

五、正常细胞系鉴定讨论及小结

第二节 癌细胞系、转化细胞系的建立和鉴定

一、癌细胞系的建立

二、癌细胞建系的例证

三、转化细胞系建立

四、癌细胞和转化细胞建系讨论和小结

五、癌细胞系和转化细胞系的鉴定

六、癌细胞和转化细胞系建立和鉴定的小结和讨论

第六章 细胞周期分析与细胞克隆化技术

第一节 细胞周期概述

第二节 细胞周期调控

第三节 细胞同步化方法

一、使细胞同步化在Go／G1期方法

二、使细胞同步化在G1期

三、使细胞同步化在G1／S期交界点

四、使细胞同步化在有丝分裂期（M期）

第四节 细胞周期分析

一、流式细胞仪分析细胞周期

二、H-TdR掺入DNA法

三、PCNA法

四、测定细胞周期的其他方法

第五节 细胞克隆的概念及培养方法

一、细胞克隆的基本概念

二、细胞克隆的培养方法

第七章 器官培养

第一节 器官培养的要求

一、器官培养的取材

二、培养基

三、培养环境中的气体

四、培养器官的支持物

第二节 器官培养技术的特点

一、优点

二、不足

第三节 器官培养的方法

一、固体培养基器官培养法

二、液体培养基器官培养法

三、动态器官培养法

四、体内器官培养法

第四节 器官培养的应用

一、器官培养在胚胎发育研究中的应用

二、器官培养在器官功能及其代谢研究中应用

三、器官培养在肿瘤侵袭研究中的应用

第八章 干细胞的培养

第一节 胚胎干细胞

一、胚胎干细胞的培养

二、胚胎干细胞的形态特征及其鉴定

第二节 神经干细胞

一、神经干细胞的概念及生物学特征

二、神经干细胞的分离与培养

第三节 造血干细胞

一、造血干细胞的定义及生物学特征

二、造血干细胞的分离及培养

第四节 间充质干细胞

一、从骨髓细胞中分离MSC细胞

二、流式细胞仪分离鉴定MSC

三、MSCs克隆形成试验

四、人的MSC细胞系培养

五、MSC细胞向脂肪细胞谱系分化

六、MSC诱导分化为软骨细胞软骨细胞团试验

七、MSC诱导分化为成骨细胞谱系

八、不同组织来源的MSC的特殊表面标志

第五节 表皮组织干细胞

一、移植人皮肤培养表皮干细胞

二、角质形成细胞的鉴定

第六节 胰岛干细胞

一、人胰腺导管制备胰岛干细胞

二、从小鼠胚胎干细胞系定向诱导分化为胰岛干细胞

第七节 鉴定干细胞及分化细胞类型的标志

第八节 体细胞重编程为多能干细胞

一、细胞培养

……

第九章 细胞培养在细胞分化研究中的应用

第十章 细胞培养在细胞衰老、凋亡研究中的应用

第十一章 细胞融合与单克隆抗体制备

第十二章 细胞培养的应用

第十三章 细胞毒性

第十四章 细胞培养常见问题解答

附录Ⅰ 实验室常用的细胞系（株）

附录Ⅱ-1 常用缓冲液

附录Ⅱ-2 其他缓冲液的配制

附录Ⅲ 常用人工合成细胞培养基

附录Ⅳ 细胞培养常用英语词汇

中英文名词对照索引

《组织和细胞培养技术（第3版）/全国高等医药教材建设研究会“十二五”规划教材（附光盘）》仍以介绍实用技术为主，除介绍基本原理之外，不过多论述庞杂的理论；其次，剔除原版中已不使用或极少使用的技术方法，加入最新而实用的技术方法；再次，更加强调图片的质量，力求形态学的直观效果；最后，为了不增加使用者的经济负担，每章的篇幅基本保持不变。然而，鉴于反馈意见，我们增加了细胞毒性、培养细胞的质量控制以及细胞培养中遇到的问题及对策各一章，目的在于与时俱进，使《组织和细胞培养技术（第3版）/全国高等医药教材建设研究会“十二五”规划教材（附光盘）》更具有实用性、时代性。

授之以渔，而不是授之以鱼
　　述评结合，而不是述而不评
　　启示创新，而不是展示创新
　　回顾历史，揭示其启示意义
　　剖析现状，展现当前的困惑
　　展望未来，预测其发展方向
　　研究生需要教材吗？
　　多年来，一提到医学研究生教材．很多专家就会说，研究生培养是“非应试性”的“个性化”教育，不需要专门的教材。即便是今天．如果事前没有对这套教材的深入了解，相信很多人还会这样想……
　　在过去的10余年里．全国高等医药教材建设研究会在全国范围内开展了多次、大规模的调研和论证，并进行了大量的编写探索。最后专家们普遍认为，研究生教材是否需要写的关键取决于怎么写。因为研究生需要的不是更多的“鱼”，而是“渔”。于是，研究会突破传统教材的编写思路．拟定了以解决研究生科研和临床中实际遇到的问题为立足点，以“回顾、现状、展望”（回顾学科发展的转折点事件，剖析学科当前的困惑、局限与不足，展望未来）为线索，以引导、启发研究生创新思维为目的的研究生教材体系……
　　为了实现上述目标．一大批原本不赞同、不支持编写研究生教材的院士、知名专家担任起了这套教材的倡导者和践行者。寄望于这套教材能为创新性人才的培养起到“探照灯”的作用，能为科研工作者及专科医师创新性工作的开展起到“导航仪”的作用……