蛋白质色谱分离技术

第1章 绪论

1.1 引言

1.2 蛋白质纯化方法

1.2.1 蛋白质与小分子纯化方法的比较

1.2.2 蛋白质常用纯化方法

1.2.3 蛋白质的分离工艺过程

1.2.4 纯化工艺设计基本原则

1.2.5 蛋白质纯化常用仪器和试剂

1I2.6 蛋白质纯化应注意的事项

1.3 蛋白质样品制备技术

1.3.1 原材料的选择

1.3.2 原材料的破碎技术

1.3.3 样品的提取

1.3.4 样品的回收

1.3.5 提取液的处理技术

1.4 蛋白质的沉淀分离技术

1.4.1 盐析法

1.4.2 有机溶剂沉淀法

1.4.3 其他沉淀法

1.5 膜分离技术在蛋白质纯化中的应用

1.5.1 概述

1.5.2 膜分离技术的分离原理及膜产品种类

1.5.3 膜技术生物分离中的应用

参考文献

第2章 色谱法分类及理论

2.1 色谱分类及装置

2.1.1 色谱分类方法

2.1.2 经典柱液相色谱技术

2.1.3 高效液相色谱技术

2.1.4 工业制备液相色谱技术

2.1.5 经典色谱、高效色谱、制备色谱三者间的关系

2.2 固定相

2.2.1 基质

2.2.2 填料的形状、大小、孔径、结构及分布

2.2.3 配基

2.3 流动相

2.3.1 对流动相的一般要求

2.3.2 流动相的主要性质

2.4 基本理论

2.4.1 保留值

2.4.2 柱效能指标

2.4.3 分离效能总指标

参考文献

第3章 离子交换色谱

3.1 引言

3.2 离子交换作用

3.2.1 溶液中蛋白质的带电状况

3.2.2 离子交换

3.3 离子交换色谱保留机理

3.3.1 静电作用保留模型

3.3.2 计量置换保留模型

3.4 离子交换填料

3.4.1 离子交换填料的结构与分类

3.4.2 离子交换填料的种类

3.5 离子交换色谱填料的合成

3.5.1 硅胶基体离子交换填料的合成

3.5.2 高分子聚合物基体离子交换填料的合成

3.5.3 琼脂糖基体离子交换填料的合成

3.5.4 交联葡聚糖基体离子交换填料的合成

3.5.5 纤维素基体离子交换填料的合成

3.6 离子交换填料的性能及检测

3.6.1 外观

3.6.2 粒径分布测定

3.6.3 最大耐压和最大流速的测定

3.6.4 交换容量的测定

3.6.5 蛋白质吸附量的测定

3.7 离子交换色谱条件的选择

3.7.1 色谱填料的选择

3.7.2 柱子的选择

3.7.3 流动相选择

3.7.4 洗脱模式

3.7.5 其他色谱条件

3.8 离子交换色谱的应用

3.8.1 色谱技术

3.8.2 硅胶基体离子交换色谱应用实例

3.8.3 多糖基体离子交换色谱应用实例

3.8.4 规模放大的色谱条件

3.8.5 IEC在蛋白质折叠复性中的应用

3.9 离子交换色谱中蛋白质的累加进样分离法

3.9.1 离子交换色谱中蛋白质洗脱曲线有突跃

3.9.2 离子交换色谱中蛋白质的累加进样分离法

3.9.3 离子交换色谱中蛋白质的累加进样分离法浓集样品

3.9.4 离子交换色谱中蛋白质的选择性保留分离法

3.1 0多模式离子交换色谱

参考文献

第4章 亲和色谱

4.1 引言

4.2 基本原理

4.3 亲和色谱填料

4.3.1 基体

4.3.2 配体

4.3.3 间隔臂

4.4 亲和色谱填料的制备

4.4.1 亲和色谱合成路线

4.4.2 多糖基体亲和色谱填料的制备

4.4.3 硅胶基体亲和色谱填料的制备

4.4.4 亲和色谱填料的性能评价

4.4.5 已商品化的多糖基体亲和色谱填料及中间体

4.5 若干类型亲和色谱介绍

4.5.1 固定金属离子亲和色谱

4.5.2 染料亲和色谱

4.5.3 凝集素亲和色谱

4.5.4 生物专一性亲和色谱

4.5.5 共价亲和色谱

4.5.6 磁性亲和色谱

4.6 亲和色谱操作技术

4.6.1 样品制备

4.6.2 装柱及平衡

4.6.3 上样及洗涤

4.6.4 洗脱

4.6.5 再生

4.6.6 柱子的保存

4.7 亲和色谱的应用

4.7.1 生物大分子分离纯化和分析中的应用

4.7.2 临床检测和治疗中的应用

4.7.3 活性细胞膜色谱的应用

4.7.4 食品安全性检查和农药残留检测中的应用

参考文献

第5章 排阻色谱

5.1 引言

5.2 排阻色谱原理

5.3 排阻色谱固定相

5.3.1 排阻色谱柱的参数

5.3.2 排阻色谱填料的要求及种类

5.3.3 葡聚糖凝胶

5.3.4 琼脂糖凝胶

5.3.5 硅胶基体凝胶

5.3.6 聚丙烯酰胺凝胶

5.3.7 复合凝胶Sephacryl和Superdex

5.3.8 有机高分子类凝胶

5.4 排阻色谱条件

5.4.1 柱子填料

5.4.2 柱子尺寸

5.4.3 洗脱模式及流动相

5.4.4 流速

5.4.5 上样量

5.5 排阻色谱的一般操作

5.5.1 排阻色谱凝胶的准备

5.5.2 排阻色谱的操作

5.6 排阻色谱的应用

5.6.1 蛋白质等大分子的分离纯化

5.6.2 大分子的脱盐和脱小分子物质

5.6.3 分子量测定

……

第6章 反相色谱

第7章 疏水作用色谱

第8章 新型色谱和其他分享技术简介

第9章 制备液相色谱技术

第10章 蛋白质的保存技术

第11章 蛋白质样品鉴定技术

参考文献

《蛋白质色谱分离技术》系统讲述了蛋白质分离的各种液相色谱的原理、填料结构和合成、色谱条件的选择和应用，同时介绍了蛋白质样品的处理、多种色谱新技术、制备色谱、蛋白质的保存技术和蛋白质的定性定量和纯度检测技术等。全书内容系统，还使用了大量图、表便于读者理解内容。
《蛋白质色谱分离技术》可作为从事生物化学、生物化工、生化制药、基因工程、药品分析和血液制品等专业的科技工作者阅读使用，也可作为相关专业大学生和研究生的参考书