现代基因操作技术

第一章 基因与基因组

第一节 核酸的结构与功能

第二节 染色体的结构

第三节 遗传信息的传递

第四节 基因及其结构

第五节 基因组

第六节 基因的表达与调控

第二章 核酸提取技术

第一节 基本原理

第二节 DNA的提取

第三节 RNA的提取

第四节 核酸的定量与保存

第三章 基因扩增技术

第一节 基本原理

第二节 引物设计

第三节 反应体系

第四节 常用PCR技术

第五节 PCR技术应用

第四章 电泳技术

第一节 基本原理

第二节 琼脂糖凝胶电泳

第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳

第四节 其他电泳技术

第五章 常用工具酶与基因工程载体

第一节 常用工具酶

第二节 常用基因工程载体

第六章 外源基因的克隆与表达

第一节 DNA片段的体外连接

第二节 重组子导入宿主细胞

第三节 重组克隆的筛选与鉴定

第四节 外源基因的蛋白质表达

第五节 外源基因表达产物的检测

第七章 DNA测序技术

第一节 Sanger双脱氧链终止法测序

第二节 Maxam—Gilbert化学降解法

第三节 DNA序列测定的策略

第八章 生物信息学

第一节 概述

第二节 生物信息学的研究方法与内容

第三节 生物信息数据库与查询

第四节 序列比对和数据库搜索

第九章 基因操作技术应用

案例一 猪α干扰素基因克隆、原核表达及抗病毒活性研究

案例二 淮南猪IL—2基因在昆虫细胞中的表达及生物学活性测定

案例三 H5N1亚型AIV河南株HA基因在重组禽痘病毒的表达

第十章 实验部分

实验一 动物基因组DNA的提取

实验二 PCR扩增目的基因

实验三 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物

实验四 扩增目的基因片段的回收、酶切与连接

实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备

实验六 转化

实验七 质粒DNA的提取与定量

实验八 转化克隆的筛选和鉴定

实验九 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达

实验十 SDS—PAGE电泳检测表达蛋白

附录一 基因操作技术实验室操作规范及注意事项

附录二 细菌培养基的配制

附录三 常用溶液与配制

附录四 常用实验设备的使用规则、方法

参考文献

本书详细介绍了核酸提取，基因扩增，重组子的筛选、分离及鉴定方法；系统地阐述了有关基因重组的常用工具酶、载体以及重组技术等。