生物技术综合实训教程

单元一生物技术实训基础

学习情境一认识生物技术实训室1

工作任务1认识生物技术实训室管理规范1

工作任务2认识和熟悉常见实训操作室7

工作任务3生物技术实训室主要仪器设备的使用12

学习情境二生物技术基本实验技能32

工作任务1实验器皿的清洗、干燥与灭菌32

工作任务2常用缓冲液的配制34

工作任务3微量移液器使用36

工作任务4培养基（液）配制37

单元二生物技术实训单项技能

学习情境一微生物的培养及纯化技术41

工作任务1病毒的鸡胚培养41

工作任务2产淀粉酶细菌的复壮45

工作任务3食用菌母种的分离纯化47

学习情境二微生物数量的测定技术51

工作任务1水中细菌总数的检测51

工作任务2多管发酵法测定水中大肠菌群54

学习情境三微生物的大规模培养技术58

工作任务1微生物三角瓶培养58

工作任务2发酵罐操作60

学习情境四动物细胞培养技术65

工作任务1鸡胚成纤维细胞的原代培养65

工作任务2传代培养技术——PK15细胞的培养69

学习情境五基因的克隆表达技术72

工作任务1猪γ 干扰素基因的克隆及在大肠杆菌中的表达72

工作任务2鸡白介素 18基因真核表达载体的构建及其表达78

学习情境六常用的分离纯化技术单元操作82

工作任务1酵母细胞的破碎及破碎率的测定82

工作任务2沉淀法从牛奶中粗制酪蛋白和乳蛋白素83

工作任务3离子交换色谱分离氨基酸85

工作任务4青霉素的萃取分离87

学习情境七生物大分子的电泳检测技术89

工作任务1DNA的琼脂糖凝胶电泳检测89

工作任务2蛋白质的SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测92

学习情境八生物大分子含量的检测技术98

工作任务1Folin 酚试剂法测定蛋白质含量98

工作任务2微量凯氏定氮法测定蛋白质含量100

工作任务3紫外分光光度法测定蛋白质含量104

工作任务4饲用纤维素酶活力的测定105

工作任务5肉制品中总糖含量测定107

学习情境九免疫学检测技术110

工作任务1鸡新城疫抗体效价的测定110

工作任务2琼脂扩散试验113

工作任务3兔抗人免疫球蛋白抗体的测定116

工作任务4对流免疫电泳118

单元三生物活性物质的制备技术

学习情境一天然生物材料成分的提取技术122

工作任务1猪血清免疫球蛋白的分离纯化及鉴定122

工作任务2细胞色素C的制备及鉴定124

工作任务3植物超氧化物歧化酶的制备127

工作任务4银杏叶黄酮类物质的分离纯化130

学习情境二重组蛋白的分离纯化技术133

工作任务猪γ 干扰素基因工程菌的发酵培养和产物的分离纯化133

单元四生物制品的制备技术

学习情景一疫苗的生产技术136

工作任务1猪链球菌氢氧化铝胶苗的制备137

工作任务2鸡新城疫油乳剂灭活苗制备138

工作任务3人用狂犬病疫苗制备140

学习情景二抗体类制品制备技术144

工作任务1鸡传染性法氏囊高免卵黄抗体的制备144

工作任务2猪瘟高免血清的制备146

工作任务3人IgG单克隆抗体制备147

学习情景三诊断类制品的制备152

工作任务1马立克病琼脂扩散试验抗原的制备技术152

工作任务2胶体金标记技术153

单元五发酵类产品的制备技术

学习情境一发酵乳制品生产技术158

工作任务1凝固型酸牛奶的制作158

工作任务2奶酪的制作161

学习情境二发酵调味品生产技术164

工作任务1酱油的生产制作164

工作任务2食醋的制作168

工作任务3豆腐乳的制备172

学习情境三酒类产品生产技术175

工作任务1白酒的生产175

工作任务2啤酒的生产177

工作任务3酒精的发酵生产185

工作任务4干白葡萄酒的生产187

学习情境四饲用微生态制剂及酶制剂生产技术192

工作任务1枯草芽孢杆菌菌粉的制备192

工作任务2纤维素酶的固态发酵生产198

工作任务3蛋白酶的液态深层通风发酵生产200

学习情境五现代工业发酵产品生产技术205

工作任务1谷氨酸发酵生产205

工作任务2柠檬酸发酵生产209

工作任务3土霉素发酵生产213附录

Ⅰ常用染色液的配制217

Ⅱ常用培养基的配制219

Ⅲ常用缓冲液的配制

Ⅳ其他常用数据

本教材共包括五个单元，每个单元由多个学习情境构成（共计21个学习情境），每个学习情境又细分为若干个工作任务（共计61个工作任务），每个工作任务以下发工作任务书—明确工作任务流程—准备工作材料—完成工作任务—撰写工作报告等形式展现。其中单元一为生物技术实训基础，目的是训练学生熟练掌握生物技术实训必备的基础知识和基本实验技能；单元二为生物技术实训单项技能，目的是强化学生对微生物技术、动物细胞培养技术、基因克隆及表达技术、分离纯化技术、电泳技术、含量测定技术、免疫检测技术等专项技能的掌握；后三个单元为综合实训，分别包括生物活性物质的制备技术、生物制品的制备技术和发酵类产品的制备技术，目的是结合生物技术专业的岗位需求，以典型产品的生产过程为主线，在实训室模拟真实生产任务或工作过程，强化学生综合技能，培养学生分析问题解决问题的能力，提高学生就业的核心竞争力。 本教材适合本科院校高职高专院校生物技术及相关专业使用，也可供从事生命科学研究的技术人员参考。