分子克隆实验指南精编版

第1章分子克隆中使用的质粒载体的制备

方案1.1SDS碱裂解法制备质粒DNA：小量制备

方案1.2SDS碱裂解法制备质粒DNA：中量制备

方案1.3SDS碱裂解法制备质粒DNA：大量制备

方案1.4煮沸法小量制备质粒DNA

方案1.5煮沸法大量制备质粒DNA

方案1.6用牙签挑取菌落小量制备质粒DNA

方案1.7SDS裂解法制备质粒DNA

方案1.8聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA

方案1.9层析法纯化质粒DNA

方案1.10氯化铯?溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA：连续梯度法

方案1.11氯化铯?溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA：不连续梯度法

方案1.12有机溶剂萃取法从DNA中去除溴化乙锭

方案1.13离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭

方案1.14NaCl离心法去除质粒DNA样品中的小片段核酸

方案1.15SephacrylS-1000层析法去除质粒DNA样品中的小片段核酸

方案1.16氯化锂沉淀法去除质粒DNA样品中的小片段核酸

方案1.17在质粒载体中进行定向克隆

方案1.18在黏性末端上连接接头

方案1.19在质粒载体中进行平末端克隆

方案1.20质粒DNA的去磷酸化

方案1.21平末端DNA连接合成的接头

方案1.22在低熔点琼脂糖中连接质粒和目的DNA

方案1.23制备和转化大肠杆菌感受态的Hanahan方法：高效的转化方法

方案1.24制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法：超级感受态细胞

方案1.25氯化钙制备大肠杆菌感受态

方案1.26大肠杆菌的电转化

方案1.27用X-gal和IPTG筛选细菌克隆：α互补

方案1.28小量细菌克隆的杂交筛选

方案1.29中量细菌克隆的杂交筛选

方案1.30大量菌落的杂交筛选

方案1.31菌落的裂解和DNA与滤膜的结合

方案1.32在滤膜上进行细菌DNA的杂交

第2章λ噬菌体及其载体

第3章M13噬菌体载体

第4章高容量载体的应用

第5章DNA凝胶电泳和脉冲场琼脂糖凝胶电泳

第6章真核基因组DNA的制备和分析

第7章真核细胞mRNA的提取、纯化和分析

第8章聚合酶链反应体外扩增DNA

第9章放射性标记DNA探针与RNA探针的制备

第10章人工合成的寡核苷酸探针

第11章cDNA文库制备及基因鉴定

第12章DNA测序

第13章诱变

第14章表达文库的筛选

第15章克隆基因在大肠杆菌中的表达

第16章克隆基因转入培养的哺乳动物细胞

第17章哺乳动物细胞基因表达分析

第18章蛋白质相互作用研究技术

附录

索引

　　当一个实验室开始开展分子生物学研究时，这本书会成为实验室的第一个访客。本书是《分子克隆实验指南》第三版的精编版，著者将原第三版的实验材料和操作技术部分抽出来并进行了适当的修正，从而使三卷本的大作汇成了精悍的一本。精编版囊括了原第三版中的“step-by-step”实验方案以及精心选择的附录部分，经原第三版的相同译者翻译并认真校订为中文，在准确性、实用性方面都有所增强。　　《分子克隆实验指南》第三版作为一本准确、可靠、明晰的实验操作手册，获得广泛的赞誉，已成为分子生物学工作者必备的案头工具书。　　第三版在前两版的基础上对图书内容进行彻底的更新，修改了每一个方案，增加了大量的新内容，拓宽了学科范围，涵盖了各类常规技术、成熟技术和新技术，这些实验技术都是目前世界范围内分离、分析和克隆DNA分子顶尖实验室日常工作中经常用到的。　　本书是《分子克隆实验指南》第三版的精编版，著者将原第三版的实验材料和操作技术部分抽出来并进行了适当的修正，从而使三卷本的大作汇成了精悍的一本。精编版囊括了原第三版中的“step-by-step”实验方案以及精心选择的附录部分，经原第三版的相同译者翻译并认真校订为中文，在准确性、实用性方面都有所增强。　　精编版专为实验台边的工作者设计，对于遗传学、分子生物学、细胞生物学、发育生物学、神经科学和免疫学专业的学生具有无与伦比的价值，同时给单个研究者提供了“一书在手、方案全览”的便利。