细胞培养技术

第一篇动物细胞培养技术

第一章动物细胞培养概述

第一节动物细胞培养的基本概念及其优缺点

一、动物细胞培养的概念

二、动物细胞培养的优缺点

第二节动物细胞培养发展史

一、动物细胞培养技术的创立

二、动物细胞培养技术的发展

第三节动物细胞培养的应用

一、在生物学领域的基础研究中的应用

二、在临床医学上的应用

三、在动物育种上的应用

四、在生物制品生产上的应用

第四节动物细胞培养工作的基本要求和工作方法

一、动物细胞培养工作的基本要求

二、动物细胞培养工作方法

[理论难点自测]

实验实训项目动物细胞培养的无菌操作

第二章动物细胞培养的基本知识

第一节培养细胞的细胞生物学

一、培养细胞的生长类型和形态特征

二、培养细胞分化状态的变化

三、培养细胞的生长特点

四、培养细胞的生长和增殖过程

第二节培养细胞的生长条件

一、营养需要

二、生存环境

第三节动物细胞培养实验室

一、动物细胞培养实验室的设置

二、动物细胞培养实验室的设备

三、动物细胞培养实验室常用器具

[理论难点自测]

实验实训项目动物细胞培养常用设备的使用

第三章动物细胞培养的准备工作

第一节培养用品的清洗、包装和灭菌

一、培养用品的清洗

二、培养用品的包装

三、培养用品的消毒灭菌

第二节动物细胞培养用液的类型、配制和无菌处理

一、平衡盐溶液

二、消化液

三、天然培养基

四、合成培养基

五、完全培养基

六、无血清培养基

七、其他常用液

[理论难点自测]

实验实训项目一动物细胞培养实验器具的清洗、包装和灭菌

实验实训项目二几种动物细胞培养用液的配制和无菌处理

第四章动物细胞培养的基本技术和方法

第一节培养细胞的取材与分离

一、培养细胞的取材

二、组织材料的分离

第二节动物细胞的原代培养技术

一、组织块培养法

二、消化培养法

第三节培养细胞的观察和检测技术

一、培养细胞的常规观察

二、细胞生长曲线的测定

三、细胞培养的污染检测及其排除

第四节动物细胞传代培养技术

一、原代培养的首次传代

二、细胞传代方法

三、细胞系的维持

第五节细胞的冻存、复苏和运输技术

一、细胞的冻存

二、细胞的复苏

三、细胞的运输

[理论难点自测]

实验实训项目一细胞计数及密度换算

实验实训项目二小鼠胎儿细胞的原代培养(组织块培养法)

实验实训项目三鸡胚原代细胞的培养(消化培养法)

实验实训项目四培养细胞的观察

实验实训项目五细胞活性检查

实验实训项目六原代培养细胞的传代

实验实训项目七细胞冻存技术

实验实训项目八细胞的常规复苏技术

第五章动物细胞的大规模培养

第一节动物细胞大规模培养概述

一、动物细胞大规模培养技术的概念

二、动物细胞大规模培养技术的应用

三、动物细胞大规模培养的一般工艺流程

第二节动物细胞大规模培养的方法和操作方式

一、动物细胞大规模培养的方法

二、大规模培养技术的操作方式

第三节动物细胞生物反应器

一、搅拌罐式生物反应器

二、气升式生物反应器

三、中空纤维生物反应器

四、其他生物反应器

[理论难点自测]

实验实训项目一Vero细胞的微载体培养

实验实训项目二动物细胞生物反应器的使用或参观

第六章特殊细胞培养概要

第一节正常组织细胞的培养

一、上皮细胞培养

二、神经细胞培养

第二节肿瘤细胞培养

一、体外培养肿瘤细胞的生物学特性

二、肿瘤细胞的培养要点

[理论难点自测]

实验实训项目一异体动物接种成瘤实验

实验实训项目二肿瘤细胞的软琼脂集落实验

第七章与动物细胞培养相关的部分实验技术

第一节单克隆抗体的制备

一、单克隆抗体的概念

二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理

三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程

四、制备单克隆抗体可能出现的主要问题

第二节细胞的基因转染技术

一、待转染细胞的准备

二、常用的细胞转染方法

[理论难点自测]

实验实训项目一细胞融合

实验实训项目二细胞克隆

第二篇植物细胞培养技术

第八章植物细胞培养概论

第一节植物组织与细胞培养

一、植物组织培养

二、植物细胞培养

第二节植物细胞培养的发展史

一、植物细胞培养的创立阶段

二、植物细胞培养的发展阶段

三、植物细胞培养的应用研究阶段

第三节植物细胞培养的应用

一、在植物育种方面的应用

二、在植物脱毒方面的应用

三、在离体快繁方面的应用

四、在植物种质资源保存方面的应用

[理论难点自测]

实验实训项目植物细胞培养无菌操作训练

第九章植物细胞培养的条件

第一节植物细胞培养的实验室条件

一、植物细胞培养实验室的设计

二、植物细胞培养实验室的仪器和设备

三、植物细胞培养的培养器具

第二节植物细胞培养的培养基

一、培养基的组成

二、常用的植物细胞培养基种类

三、植物细胞培养的培养基配制

第三节植物细胞培养的环境条件

一、温度

二、湿度

三、光照

四、气体

五、pH

[理论难点自测]

实验实训项目一植物组织细胞培养基母液的配制和保存

实验实训项目二植物组织细胞培养基的配制和灭菌

实验实训项目三植物细胞培养常用设备的使用

第十章植物细胞培养的基本过程和方法

第一节植物细胞的获取

一、从外植体直接分离植物细胞

二、通过愈伤组织诱导获取植物细胞”

第二节植物细胞的悬浮培养

一、悬浮细胞的诱导

二、悬浮培养细胞的生长和测定

三、悬浮培养细胞的同步化

第三节植物细胞的固定化培养

一、植物细胞固定化的方法

二、固定化植物细胞的培养方法

第四节单细胞培养

一、植物单细胞的制备

二、植物单细胞的培养

三、影响植物单细胞培养的因素

第五节原生质体培养

一、植物原生质体的特点

二、植物原生质体的制备

三、植物原生质体的培养方法

[理论难点自测]

实验实训项目一胡萝卜和白菜成熟胚愈伤组织培养

实验实训项目二植物细胞悬浮培养

第十一章植物细胞的大规模培养

第一节植物细胞大规模培养概述

一、植物细胞大规模培养技术的概念

二、植物细胞大规模培养的应用和工业前景

三、植物细胞大规模培养流程

第二节植物细胞大规模培养技术

一、植物细胞规模化培养体系的建立

二、植物细胞的大规模培养方法

第三节植物细胞生物反应器

一、搅拌式生物反应器

二、非搅拌式生物反应器

三、植物细胞固定化培养生物反应器

[理论难点自测]

实验实训项目种子细胞筛选与细胞规模化培养

附录细胞培养技术常用术语中英文对照

参考文献

本教材共分为两篇。第一篇为动物细胞培养技术，主要包括：动物细胞培养的概念、发展史和应用，动物细胞培养实验室的设置、设备和器具，动物细胞培养的准备工作，动物细胞原代培养、传代培养、培养细胞的观察和检测，动物细胞冷冻、复苏和运输，动物细胞大规模培养，特殊动物细胞培养，与动物细胞培养相关的部分实验技术。第二篇为植物细胞培养技术，主要包括：植物细胞培养的概念、发展史和应用，植物细胞培养的实验室条件、营养条件和环境条件，植物细胞的悬浮培养、固定化培养、单细胞培养和原生质体培养，植物细胞大规模培养。本书为普通高等教育“十一五”国家级规划教材。本教材分为动物细胞培养技术和植物细胞培养技术两篇，以实践技术为主线，主要介绍了动植物细胞培养的概念与应用、动植物细胞的培养条件、动植物细胞的培养技术及动植物细胞的大规模培养。考虑学生今后工作的实际需要，本书还增设了特殊细胞培养和与动物细胞培养相关的部分实验技术两章内容，以便学生更好地适应职业需要。　　本书每章均附有学习目标及理论难点自测，以便学生能够更好地学习和掌握每章的知识要点，多类型的自测题为学生复习、掌握、巩固本章知识提供了便利，每章还配有相关的实验实训项目，以培养和提高学生的实践能力。　　本书配有实验实训光盘，使实验实训教学更为直观，也可供无实验条件的单位开展观摩教学。　　本书适用于高职高专生物技术、微生物技术、生物制药技术、食品类及农林类专业学生作为教材使用，也可供相关专业的中初级技术人员和教师参考。