细胞生物学实验

前言

实验室规则

细胞生物学实验绘图方法与要求

第一部分 基础性实验

实验1 普通光学显微镜的构造及使用

实验2 特殊光学显微镜的构造及使用

Ⅰ暗视野显微镜

Ⅱ相差显微镜

Ⅲ荧光显微镜

Ⅳ激光扫描共聚焦显微镜

实验3 石蜡切片法制备光学显微镜标本

实验4 冰冻切片法制备光学显微标本

实验5 透射电子显微镜及样品制备

实验6 扫描电子显微镜及样品制备

实验7 细胞形态观察、大小测量及死细胞和活细胞鉴定

实验8 液泡系的超活染色与动态观察

实验9 线粒体超活染色技术与数目统计

实验10 细胞骨架观察

Ⅰ 微丝观察

Ⅱ 微管观察

实验11 碱性磷酸酶和酸性磷酸酶染色技术

实验12 核仁组成区银染色技术（Ag—NOR染色法）

实验13 多糖的细胞化学显示法——PAS反应

实验14 DNA的细胞化学显示法——Feulgen反应

实验15 RNA的细胞化学显示法——Brachet反应

实验16 细胞器的分离与鉴定

实验17 基因组DNA的提取与检测

Ⅰ 动物细胞基因组DNA提取

Ⅱ 植物细胞基因组DNA提取

Ⅲ 基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验18 真核细胞总RNA提取与检测

Ⅰ TRIzol试剂提取小鼠肝脏总RNA

Ⅱ 热酸性酚法提取酵母总RNA

实验19 细胞无丝分裂和有丝分裂的形态观察

实验20 细胞减数分裂的形态观察

实验21 超前凝集染色体标本的制备与观察

实验22 细胞的原代培养

实验23 细胞的传代培养

实验24 细胞的冻存与复苏

实验25 细胞融合实验

实验26 流式细胞仪测定细胞DNA含量

第二部分 综合性实验

实验27 冠状动脉平滑肌细胞的分离、培养、鉴定与生长曲线绘制

实验28 荧光原位杂交确定特定核酸序列的定位

实验29 磷酸钙沉淀法将DNA导入细胞

实验30 RT-PCR检测大鼠肝再生中肌动蛋白基因的表达

实验31 Western blot检测HeLa细胞Hsp70表达

实验32 重组EGFP在小鼠肝脏中瞬时表达的观察（液压转基因法）

实验33 蛋白质与蛋白质相互作用检测——酵母双杂交筛选

第三部分 设计性实验

实验34 不同类群细胞大小和结构的比较

实验35 植物细胞中叶绿体的原位观察

实验36 不同方法制备同步化细胞的效果比较

实验37 细胞凋亡的诱导和检测

参考文献

附录

附录一 离心机转数与离心力的换算表

附录二 常用溶液的配制和使用

附录三 生物标本常用染料性能简介和常用染色剂配方

附录四 常用玻璃、塑料仪器的清洗和干燥

附录五 试剂规格

附录六 常用单位

彩图

《细胞生物学实验（第2版）》是作者李芬、胡海燕根据多年教学实践并采纳第1版使用过程中的意见和建议编写而成，是细胞生物学教学改革的主要成果，从基础性、综合性和设计性3个层面设置实验37个。涵盖了部分经典的细胞生物学实验，增添了一些现代细胞和分子生物学新技术，内容包括光学及电子显微镜技术，细胞形态结构，细胞化学及组分分离，细胞分裂与早熟染色体凝集，细胞培养、冻存、复苏及融合，转染，荧光原位杂交，免疫印迹，免疫荧光，酵母双杂，细胞同步化及凋亡的诱导和检测等。
　　《细胞生物学实验（第2版）》可供综合性大学，农林、师范及医学院校生命科学相关专业本科生使用，也可作为相关研究人员的参考书。