生物化学与分子生物学实验教程

第一部分普通生物化学实验

一、基础实验

实验一微量凯氏(Kjeldahl)定氮法

实验二氨基酸的分离鉴定纸层析法

实验三蛋白质的性质实验(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应

实验四蛋白质的性质实验(二)蛋白质的等电点测定和沉淀反应

实验五血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳

实验六核酸的定量测定定磷法

实验七酵母核糖核酸的分离及组分鉴定

实验八酶的特性

二、开放及综合设计性实验

实验九血糖的定量测定(Hagedorn-Jensen二氏定糖法)

实验十脂肪酸的B一氧化

实验十一血液中转氨酶活力的测定(分光光度法)

实验十二2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C的含量

实验十三过氧化氢酶的作用

实验十四过氧化物酶的作用

实验十五尿液淀粉酶活力测定(Winslow氏法)

实验十六柑橘皮提取果胶

第二部分生物化学技术大实验

一、基础实验

实验一离子交换柱层析法分离氨基酸

实验二蛋白质含量的测定

实验三凝胶过滤法测定蛋白质相对分子质量

实验四薄层层析法分离AMP、ADP和ATP

实验五动物肝脏DNA的制备和含量测定

实验六DNA的琼脂糖凝胶电泳

二、开放及综合设计性实验

实验七SDS-聚丙烯酰胺电泳法测定蛋白质相对分子质量

实验八DNS-Cl法分析蛋白质N-末端氨基酸

实验九酵母蔗糖酶的提取及纯化

实验十蔗糖酶动力学研究

实验十一脲酶动力学研究

实验十二乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)

实验十三L-谷氨酸脱羧酶的固定化

实验十四枯草杆菌细胞固定化

实验十五细胞色素c的制备及测定

实验十六大鼠肝细胞的单细胞凝胶电泳

第三部分分子生物学实验

一、基础实验

实验一质粒DNA的提取

实验二质粒DNA的酶切及凝胶电泳

实验三大肠杆菌感受态细胞的制备及转化

实验四重组质粒的连接、转化及筛选

实验五基因组DNA的提取及检测

实验六RNA的分离与纯化

实验七PCR基因扩增

实验八DNA片段的回收与纯化

实验九外源基因在大肠杆菌中的诱导及表达

实验十核酸杂交技术

实验十一双向聚丙烯酰胺凝胶电泳

二、开放及综合设计性实验

实验十二用exoⅢ外切酶构建亚克隆

实验十三利用T载体克隆绿色荧光蛋白(GFP)基因

实验十四cDNA文库构建

三、分子生物学新实验技术

第一节生物芯片技术

第二节核糖核酸干扰技术(RNAi技术)

第三节原位核酸分子杂交技术

附录

附录一实验室规则

附录二实验室安全及防护知识

附录三实验室常识

附录四常用数据表

附录五核酸基础数据

附录六缓冲溶液

附录七常用缓冲液的配制

附录八常用贮存液的配制

　　本书涵盖普通生物化学实验、生物化学技术大实验和分子生物学实验三部分。其中，普通生物化学实验部分为16个实验，生物化学技术大实验部分为16个实验，分子生物学实验部分为14个实验，每一部分均设计成基础实验、开放及综合设计性实验两个单元，共46个实验。书中详细叙述了实验的具体操作，罗列了每个实验所需的仪器和材料，并对实验中应注意的地方给予了提示。为了便于教学，使学生深入了解实验内容的重点和难点，掌握实验操作步骤的关键问题，提高学生对实验结果的分析能力，在每个实验后增添了思考题。书后设有附录，选择了重点知识、重要数据和参考资料共8项。本书可供综合性大学尤其是师范院校的生物技术、生物工程、生物科学等专业及农林院校的农学、植保、农化、园艺、林学等专业的学生和医学院校相关专业本科生和研究生学习之用，也可供从事生物科学工作的有关工作人员参考。　　本书以糖类、蛋白质、脂类及核酸的分离和鉴定、代谢及其调控以及分子生物学基本技术为重点，介绍了生物高分子的提取和纯化、结构和性质、酶动力学分析、分子克隆技术、层析法、电泳法等基本研究技术，并介绍了一些分子生物学新技术。本书内容全面，包括基础实验、开放及综合设计性实验，供不同院校、不同专业根据具体条件选用。　　本书可作为高等院校生物类各专业本科生和研究生生物化学与分子生物学实验教材，也可供相关教学和科研工作者参考。