细胞和分子免疫学实用实验技术

第一章 多克隆血清的制备

第二章 单克隆抗体技术

第一节 免疫方案

第二节 细胞融合及杂交瘤选择培养

第三节 阳性杂交瘤的筛选

第四节 杂交瘤的克隆化和建系

第五节 单克隆抗体的大量生产

第六节 单克隆抗体的鉴定

第七节 影响因素及分析

第三章 免疫球蛋白纯化技术

第一节 饱和硫酸铵法纯化单克隆抗体

第二节 辛酸－硫酸铵法纯化单克隆抗体

第三节 Q Sepharose Fast Flow柱层析纯化小鼠腹腔积液 IgG1

第四节 Protein A／G亲和层析柱纯化单克隆抗体

第四章 免疫球蛋白标记技术

第一节 辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体技术

第二节 异硫氰酸荧光素（FITC）标记抗体技术

第三节 藻红蛋白（PE）标记抗体技术

第四节 生物素标记抗体技术

第五章 酶联免疫吸附试验

第一节 酶联免疫吸附测定

第二节 生物素－亲合素放大的ELISA

第三节 荧光素－抗荧光素抗体放大的ELISA

第四节 化学发光免疫分析

第五节 磁分离酶免疫技术

第六章 细胞分离技术

第一节 Ficoll－Hypaque密度梯度离心法分离外周血单个核细胞

第二节 免疫磁珠法分离细胞

第七章 免疫荧光染色与显微镜观察

第一节 免疫荧光染色标本制备

第二节 荧光显微镜观察

第三节 激光共聚焦显微镜观察

第八章 流式细胞术

第一节 细胞膜表面分子免疫标记方法

第二节 细胞周期的检测分析

第三节 CFSE检测人外周血T细胞体外扩增

第四节 正常人外周血滤泡辅助性T细胞（Tfh）细胞染色技术

第五节 正常人外周血Treg细胞染色技术

第九章 免疫组织化学技术

第一节 亲和免疫化学技术

第二节 碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶免疫组化技术

第三节 组织芯片的免疫组化染色

第十章 淋巴细胞功能测定

第一节 淋巴细胞增殖检测

第二节 杀伤细胞功能测定

第三节 酶联免疫斑点实验

第四节 人白细胞抗原（HLA）的分型

第五节 HLA／抗原肽多聚体的制备和检测

第六节 趋化实验和侵袭实验

第七节 树突状细胞的分离、培养与功能检测

第十一章 人脐静脉血管内皮细胞的分离培养与功能实验

第一节 人脐静脉内皮细胞的分离培养

第二节 内皮细胞的通透性检测

第三节 内皮细胞迁移能力的检测

第四节 Matrigel成管法检测药物对内皮细胞成管能力的影响

第十二章 细胞因子检测

第一节 细胞因子的定量检测

第二节 细胞因子的生物学活性测定

第十三章 分子克隆常用技术

第一节 感受态的制备

第二节 转化

第三节 质粒提取

第四节 琼脂糖凝胶电泳

第五节 凝胶回收

第六节 重组DNA的构建

第十四章 蛋白原核表达和纯化技术

第一节 His标签融合蛋白的原核表达和亲和层析纯化

第二节 GsT融合蛋白的原核表达和亲和层析

第三节 凝胶过滤层析技术

第四节 离子交换色谱技术

第十五章 免疫学中常用的PCR技术

第一节 逆转录PcR

第二节 荧光定量PCR

第十六章 蛋白与蛋白相互作用分析

第一节 免疫共沉淀

第二节 GsT puu-down

第十七章 免疫印迹技术

第一节 蛋白样品的制备和浓度测定

第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳

第三节 免疫印迹

第十八章 常用细胞培养技术

第一节 细胞计数及活性测定

第二节 基因转染

第三节 慢病毒包装和细胞感染

第十九章 小分子RNA研究技术

第一节 siRNA研究技术

第二节 microRNA研究技术

第二十章 蛋白的亚细胞定位分析

第一节 细胞分步分离法

第二节 免疫荧光结合激光共聚焦显微镜分析

第二十一章 细胞凋亡的检测方法

第一节 细胞凋亡的形态学检测

第二节 细胞凋亡的流式细胞仪检测

第三节 DNA ladder检测

第四节 TuNEL检测

第五节 caspase－3活性检测

第二十二章 蛋白与DNA相互作用分析

第一节 ChIP Assay（染色质免疫共沉淀）

第二节 双荧光素酶报告基因检测

第二十三章 动物模型的建立与常用实验方法

第一节 自身免疫病动物模型建立

第二节 转基因动物和基因敲除动物

第三节 常用动物实验方法

第二十四章 肿瘤相关的动物模型及检测

第一节 皮下荷瘤裸鼠模型

第二节 肝原位癌裸鼠模型

第二十五章 生物信息学

第一节 常用的蛋白数据库

第二节 常用的核酸数据库

第三节 microRNA研究中常用的数据库

附录

《基础医学实验技术系列丛书：细胞和分子免疫学实用实验技术》共分二十五章，全面讲述了从基础免疫学到应用免疫学以及分子免疫学的常用实验技术，其中基础免疫学技术包括抗体的制备、纯化与标记等，应用免疫学技术包括免疫组织化学、免疫荧光染色及显微镜观察和细胞功能学实验等，分子免疫学技术包括常用的PcR技术、免疫共沉淀、chIP技术等，特别加入了激光共聚焦显微镜以及目前广泛开展的小分子RNA研究技术，以及越来越得到广泛应用的生物信息学研究策略。
　　另外，《基础医学实验技术系列丛书：细胞和分子免疫学实用实验技术》还介绍了几种常用的动物模型及研究方法。