流式细胞术

基础篇

第1章流式细胞术及其原理

1.1流式细胞术

1.2流式细胞仪的基本结构

1.2.1液流系统

1.2.2光学系统

1.2.3电子系统

1.2.4分选系统

1.3流式细胞仪的主要技术指标

1.3.1荧光分辨率

1.3.2荧光灵敏度

1.3.3前向角散射光灵敏度

1.3.4分析／分选速度

1.3.5分选纯度

1.3.6分选收获率

参考文献

第2章流式细胞术的质量控制

2.1环境要求

2.2仪器的校正

2.3样本的要求

2.4合理设计对照

2.5获取实验数据和分析

参考文献

操作篇

第3章流式细胞术单细胞悬液的制备

3.1单层培养细胞分散为单个细胞

3.2新鲜实体组织分散为单个细胞

3.2.1机械法

3.2.2酶处理法

3.2.3化学试剂处理法

3.3石蜡包埋组织分散为单个细胞

3.3.1二甲苯脱蜡法

3.3.2组织清洁剂脱蜡法

3.3.3甲氧一双氧水处理法

参考文献

第4章流式细胞术的应用

4.1细胞周期和DNA倍体分析

4.1.1概述

4.1.2荧光探针

4.1.3DNA检测的常用术语

4.1.4样品制备

4.1.5上机检测(以PI标记的标本在BDFACSCalibur流式细胞仪检测为例)

4.1.6数据分析

4.1.7注意事项

4.1.8应用举例

4.2DNA的双参数分析

4.2.1试剂

4.2.2样品制备

4.2.3上机检测

4.2.4结果分析

4.2.5注意事项

4.3凋亡检测

4.3.1凋亡的诱导

4.3.2细胞凋亡的形态学分析

4.3.3AnnexinV凋亡检测法

4.3.4caspase一3分析

4.3.5碘化丙啶(PI)单染色法

4.3.6线粒体膜电位的检测

4.3.7细胞内活性氧的检测

4.3.8DNA片段检测

4.4肿瘤细胞多药耐药检测

4.4.1细胞表面膜糖蛋白表达水平的检测

4.4.2罗丹明123蓄积实验

4.5细胞免疫表型分析

4.5.1概述

4.5.2淋巴细胞免疫表型分析

4.5.3应用举例

4.5.4影响免疫表型分析的一些问题

4.6细胞因子的测定

4.6.1细胞内细胞因子检测

4.6.2流式微球分析(cytometricbeadsarray，CBA)法检测细胞外细胞因子

参考文献

常见问题解答篇

　　本书共分三篇，内容涉及，应用流式细胞术进行：细胞周期禾口DNA倍体分析，DNA双参数分析，凋亡检测，肿瘤细胞多药耐药检测，细胞免疫表型分析，细胞因子的测定等。与同类书相比，本书更加以实际经验为基础，突出实际操作技巧，采取Step-by-Step方式进行说明，使方法与技巧更易于掌握。本书适用干医药、生命科学相关实验室的技术人员及相关研究生。　　本书分为三篇，原理篇主要介绍了流式细胞术的原理和质量控制方法；操作篇详细地介绍了流式细胞术细胞悬液的制备，以及在具体的各项应用中流式细胞术的操作方法与技巧：常见问题解答篇采用一问一答的方式，根据编写人员的实践经验，对流式细胞术中常见的问题进行详细解答。