磷脂酶Cγ2通过PKCD/MAPKs信号通路抑制大鼠肝细胞生长

书籍简介:

本书主要内容是：采用两步循环灌流法和多次低速离心分离、纯化大鼠再生肝细胞，并原代培养大鼠再生肝细胞，用构建的重组腺病毒Ad—PLCγ2感染大鼠肝细胞；用半定量PCR、RT—qPCR和Western blotting方法分别检测肝细胞中PLCγ2 mRNA和蛋白表达情况；用免疫荧光技术检测PLCγ2蛋白在肝细胞中的亚细胞定位；用四甲基偶氮唑盐（methylthiazolyltetrazolium,MTT）法检测肝细胞增殖活性；用流式细胞术（flow cytometry,FCM）测定肝细胞的细胞周期及细胞凋亡率；用分光光度计方法检测感染后大鼠再生肝细胞中Caspase—3、Caspase—8和Caspase—9的活性变化；用Western blot方法检测PLCγ2下游信号通路PKCD/JNK的磷酸化情况，Ad—PLCγ2过表达效率高，显著增加了肝细胞内PLCγ2 mRNA和蛋白表达。重组腺病毒Ad—PLCγ2成功感染体外再生肝细胞，转染效率在90%以上；肝细胞中PLCγ2 mRNA和蛋白表达显著上调（P<；0.05）。在一定范围内，PLCγ2表达呈时间依赖性。成功构建了过表达效率高的Ad—PLCγ2重组腺病毒，PLCγ2基因显著抑制体外大鼠肝细胞增殖，并诱导其凋亡；PLCγ2引起下游信号通路中PKCD、P38和JNK1/2磷酸化水平显著增加；阻断PKCD活性后，p—P38和p—JNK1/2水平显著降低，同时肝细胞凋亡受抑制，增殖能力增强。提示PLCγ2通过PKCD介导的P38和JNK1/2信号通路促进大鼠肝细胞凋亡并抑制其增殖。

书籍规格:

书籍信息归属:

磷脂酶Cγ2通过PKCD/MAPKs信号通路抑制大鼠肝细胞生长是中国农业出版社于2020.10出版的中图分类号为 Q954.48 的主题关于 磷脂酶－抑制(生理)－实验动物－肝－再生－细胞增殖－研究 的书籍。