生物化学与分子生物学实验教程

第1篇总论

实验须知

第1章基本操作技术

第1节玻璃器皿的清洗

第2节吸量管的种类和使用

第3节溶液的混匀、过滤及离心

第4节实验样品的制备

第5节分光光度法

第2章电泳技术

第1节电泳的基本原理

第2节影响电泳的主要因素

第3节区带电泳的分类

第4节几种常见的电泳方法

第5节二维电泳

第3章层析技术

第1节层析技术的分类

第2节层析中的常用术语

第3节纸层析

第4节薄层层析

第5节离子交换层析

第6节凝胶层析

第7节亲和层析

第4章离心分离技术

第1节离心分离技术的原理

第2节离心机的分类与特点

第5章印迹技术

第1节Southern印迹

第2节Northern印迹

第3节斑点杂交

第4节Western印迹

第6章聚合酶链式反应

第1节PCR技术概述

第2节PCR技术的基本原理

第3节PCR反应条件的优化

第4节PCR技术的扩展

第5节PCR中应注意的问题

第6节PCR在医学中的应用

第2篇各论

第7章蛋白质与氨基酸

实验1蛋白质含量的测定

实验2血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳定量测定

实验3凝胶层析法分离血红蛋白和DNP-鱼精蛋白(或DNP-酪蛋白)

实验4SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量

实验5蛋白质的沉淀反应

实验6酪蛋白等电点的测定

实验7氨基酸的薄层层析

实验8DNS-氨基酸聚酰胺薄膜双向层析

第8章酶学

实验9影响酶活性的因素

实验10蔗糖酶的专一性

实验11丙氨酸转氨酶活性的测定

实验12乳酸脱氢酶同工酶的分离

实验13转氨基反应

实验14琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制

实验15米氏常数的测定

第9章糖、脂和生物氧化

实验16饥饿和饱食对肝糖原含量的影响

实验17脂蛋白的分离和提纯

实验18血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳

实验19血清三酰甘油测定

实验20高密度脂蛋白中胆固醇含量测定

实验21血清总胆固醇含量测定

实验22乳酸测定

实验23血中葡萄糖含量的测定

第10章核酸

实验24细胞核的分离和纯化

实验25核酸含量的测定

实验26酵母RNA的提取及组分鉴定

实验27真核细胞基因组DNA的制备与定量

实验28DNA的限制性酶切反应

实验29Southern印迹

实验30Northern印迹

实验31PCR扩增技术

实验32随机扩增多态性DNA技术

第11章综合性实验

实验33家兔免疫血清γ-球蛋白的分离与纯度鉴定

实验34蛋白质的分离、提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳圾Western印迹

实验35脂蛋白的分离、提纯和电泳鉴定

实验36大肠埃希菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导人原核细胞、提取、纯化鉴定

实验37碱性磷酸酶的提取、比活性及km值的测定

实验38RT-PCR

实验39细菌双杂交质粒DNA的提取、纯化及鉴定

实验40apoE基因多态性分析

主要参考资料

附录

　　本书为普通高等教育“十一五”国家级规划教材《生物化学与分子生物学》的配套教材。全书共分两篇。第一篇总论除了介绍生物化学的基本操作技术外，还系统介绍了当前生物化学与分子生物学研究常用的电泳、层析、离心分离、印迹技术和聚合酶链式反应等实验技术的原理、种类、应用和前沿。第二篇各论共有40个实验。本书不仅适合医学院校5年制、7年制及8年制学生使用，也适合相关人员参考。　　本书为普通高等教育“十一五”国家级规划教材《生物化学与分子生物学》的配套教材，内容包括总论和各论，总论介绍生物化学的基本操作技术，当前生物化学与分子生物学研究常用的电泳、层析、离心分离、印迹技术和聚合酶链式反应等实验技术的原理、种类、应用和前沿；各论共有40个实验，其中蛋白质与核酸、酶学、糖、脂和生物氧化部分的实验是比较成熟的生物化学基本实验；核酸部分的实验主要是分子生物学常用技术的实验，是近几年在研究生实验课中开设并有部分实验选用到本科生实验教学中的；最后部分有8个综合性实验，在基本技能训练的基础上，对学生进行实验设计和科研入门训练。　　本书语言简练，实用性强。不仅适合医学院校5年制、7年制及8年制学生使用，也适合相关人员参考。