免疫学

前言

附录

缩略语

1抗体

1．1抗体的特性

1．1．1抗体的分子结构

1．1．2抗原-抗体结合

1．2抗体的制备

1．2．1抗原

1．2．2物种选择

1．2．3抗原免疫

1．2．4多克隆抗体

1．2．5单克隆抗体

1．2．6重组抗体

1．3抗体纯化

1．3．1沉淀法

1．3．2亲和层析法

1．3．3纯化蛋白的经典方法

1．3．4从蛋黄纯化IgY

1．3．5重组抗体的纯化

1．3．6重要的分析技术

1．4抗体的化学交联和标记

1．4．1抗体化学交联到固相载体

1．4．2酶交联到抗体上

1．4．3荧光素交联到抗体上

1．4．4生物素的交联

1．4．5金标记

1．4．6放射性同位素标记

2细胞分离

2．1根据细胞大小和密度分离：离心技术

2．1．1差速离心

2．1．2密度梯度离心

2．1．3分离介质

2．1．4离心淘洗

2．2藉助细胞表面特异性分子的分离

2．2．1黏附到塑料表面

2．2．2黏附到尼龙毛上

2．2．3红细胞玫瑰花结

2．2．4免疫磁性分离

3流式细胞术

3．1工作原理

3．2荧光物质

3．3样品制备

3．3．1细胞染色

3．4流式细胞仪的启动

3．5补偿和测量

3．5．1补偿

3．5．2测量

3．6分析

3．6．1直方图3．6．2二维点图

3．6．3密度图

3．6．4二维等高图

3．6．5假三维图

3．7模式和配置

3．7．1自动进样器

3．7．2细胞分选器

4定量免疫试验

4．1试验原理

4．1．1竞争试验

4．1．2夹心试验

4．1．3选择方法的原则

4．2放射免疫试验(RIA)

4．2．1历史问题

4．2．2实际问题

4．3酶联免疫吸附试验(ELISA)

4．3．1包板、封闭、洗涤

4．3．2酶和底物

4．3．3ELISA实践

4．4酶联斑点试验(ELISPOTAssay)

4．4．1应用和与其他方法的比较

4．4．2原理和实践

4．5微粒免疫试验(PIA)

4．5．1微珠的原理

4．5．2诱捕试验

4．5．3多元试验

4．5．4与其他免疫试验的比较

4．6放大系统

4．6．1增加标记物的密度

4．6．2多酶级联

5免疫印迹

5．1样品制备

5．2用凝胶电泳分离蛋白

5．2．1不连续SDS-PAGE

5．2．2天然凝胶电泳和等电聚焦

5．3蛋白质转移到膜上(印迹)

5．3．1湿法转移

5．3．2半干法

5．3．3误差来源

5．4蛋白质测定

5．4．1封闭

5．4．2用抗体染色

5．4．3显色

5．4．4误差来源和对照

5．5斑点和狭缝印迹

6原位免疫定位

6．1细胞悬液的分析

6．1．1细胞悬液

6．1．2细胞离心甩片

6．1．3细胞涂片6．1．4细胞包埋

6．1．5处理细胞悬液的各种方法

6．2组织分析

6．2．1准备

6．2．2固定

6．2．3石蜡包埋

6．2．4切片

6．2．5后处理

6．2．6免疫检测

6．2．7封片

6．3免疫电镜分析组织

6．3．1固定

6．3．2包埋

6．3．3超薄切片

6．3．4免疫检测

7免疫沉淀

7．1经典法

7．1．1单向免疫扩散

7．1．2双向免疫扩散(Ouchterlony法)

7．1．3放射状免疫扩散(Mancini法)

7．1．4免疫电泳

7．1．5局限性和现在的价值

7．2现今的免疫沉淀

7．2．1沉淀基质

7．2．2降低非特异性沉淀的蛋白

7．2．3免疫沉淀的分析

8细胞存活、吞噬、死亡

8．1细胞活力

8．1．1染料排斥试验

8．1．2四唑盐还原试验

8．1．3ATP试验

8．2细胞增殖

8．2．13H—TdR掺入试验

8．2．2BrdU掺入试验

8．3吞噬试验

8．3．1颗粒吞噬试验

8．3．2颗粒显现方法

8．4细胞介导的细胞毒

8．4．151Cr释放试验

8．4．2乳酸脱氢酶(LDH)释放试验

8．5凋亡试验

8．5．1染色细胞核

8．5．2DNA阶梯试验

8．5．3核小体定量ELISA

8．5．4TUNEL技术

8．5．5AnnexinV法

8．5．6Caspase活性测定

8．5．7其他方法

9特殊的免疫学试验

9．1血型测定9．2HLA分型

9．2．1淋巴细胞毒试验

9．3淋巴细胞转化试验

10实验误差统计

10．1描述统计

10．1．1位置测量

lO．1．2离散度测量

10．1．3相关性测量

10．2推论统计

10．2．1标度和数据

10．2．2科学研究过程概要

10．2．3选择适当的显著性试验

附录CD抗原

术语(专业词汇)

索引

　　本书是“实验者”系列中的一本。全书共分十章，全面讨论了抗体、抗体的来源、在体内的效应，以及作为免疫学工具的重要作用。本书介绍了流式细胞术、免疫印迹、ELISA及相关的免疫学试验，一直到细胞分离技术，原位免疫定位，也为读者指明了一些生物统计学中需要注意的问题。就像实验者系列丛书中其他的书一样．本书注重以简单易懂的方式阐释各种现代方法，并讨论每种方法的优点和不足。该书对于从事与免疫学相关的基础医学、临床医学及生物学各领域研究的学生、教师、研究人员都会有较大的参考价值。