医学生物化学与分子生物学实验教程

第一篇概论

第一章实验室基本常识

第二章生物化学实验基本操作

第二篇常用技术

第一章分光分析技术

第二章电泳技术

第三章层析技术

第四章离心技术

第五章聚合酶链反应技术

第六章印迹技术

第七章组织细胞培养技术

第三篇生物化学实验

实验一蛋白质定量测定

实验二蛋白质的沉淀反应

实验三蛋白质的两性反应和等电点测定

实验四血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳

实验五聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验六肝染色质蛋白的提取与鉴定

实验七凝胶层析法分离血红蛋白与DNP-酪蛋白

实验八DEAE-纤维素离子交换层析分离血清蛋白质

实验九亲和层析法分离乳酸脱氢酶

实验十影响酶活性的因素

实验十一碱性磷酸酶k值测定

实验十二底物浓度及抑制剂对酶活性的影响

实验十三乳酸脱氢酶同工酶的测定

实验十四血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定

实验十五转氨基作用

实验十六血糖测定及胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响

实验十七血清胆固醇总量的测定

实验十八血清尿素氮测定

实验十九酮体的生成与利用

实验二十血清(浆)过氧化脂质测定

第四篇分子生物学实验

实验一人血DNA的提取与鉴定

实验二酵母RNA的提取与成分鉴定

实验三质粒的提取、定量与酶切鉴定

实验四人p16基因的PCR扩增与扩增片段的纯化

实验五感受态细胞的制备与人p16基因扩增片段的质粒载体连接和转化

实验六重组克隆的筛选

实验七siRNA转染HeLa细胞株

实验八siRNA转染后干扰效果的RT-PCR分析

实验九siRNA转染后干扰效果的免疫印迹分析

实验十apoE基因多态性分析

附录

一、常用缓冲液及酸碱指示剂的配制方法

二、化学试剂的规格及保管

三、几种动物生化常数

四、聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配置

五、细胞培养用液的配置

六、生物化学实验常用词中英文对照

　　本书是根据五年制医学本科“生物化学”和“医学分子生物学”课程内容的体系结构与培养目标，并紧密结合学科的自身特点及实验教学与改革的实际情况而编写的。实验内容主要包括蛋白质和核酸化学、临床生化实验等传统的生化实验等。本书特增加了十个分子生物学的实验内容，如质粒DNA的提取、酶切及鉴定，感受态细胞的制备、重组DNA的导人和筛选等，供各学校在使用时选择。　　本书在实验教学内容的选择与安排方面，不仅能反映传统生物化学实验诊断技术的特点，也力求反映当前生物化学与分子生物学发展的新技术。首先，突出了常用生化实验技术的介绍和应用，旨在加强学生在生物化学方法和技术上的训练，以提高同学们的综合素质。其次，为了适应生物化学理论教材中日益增多的分子生物学内容，本书特增加了十个分子生物学的实验内容。此外，为培养学生独立思考分析与解决问题的能力，特增设了一些设计性实验。在教学方法和手段上，拟采取学生自己操作为主，适当给予示范操作、示教及结合多媒体课件进行教学，以期获得更好的实验教学效果。　　本书适合医药院校本科生使用。