植物分子生物学技术实验

第一篇 植物分子生物学常用技术

实验一质粒DNA的制备

实验二DNA酶切

实验三DNA琼脂糖凝胶电泳

实验四目的基因的PCR扩增

实验五Southern杂交

实验六Northern杂交

实验七Western杂交

第二篇 植物DNA操作技术

实验八水稻基因组DNA的提取与检测

实验九DNA酶切片段的分离与回收

实验十拟南芥未知序列的TAIL??PCR扩增

实验十一植物基因表达载体的构建

实验十二反向斑点杂交快速鉴定转基因植物

实验十三DNA的PCR定点突变

实验十四农杆菌浸花法转化拟南芥

第三篇 植物RNA操作技术

实验十五植物总RNA的提取及快速检测

实验十六植物总RNA的cDNA合成

实验十七cDNA芯片技术分析拟南芥热激因子表达

实验十八植物不同组织mRNA的实时定量PCR分析

实验十九植物RNAi载体的构建及功能鉴定

实验二十植物miRNA克隆与表达分析

实验二十一RACE技术扩增植物全长cDNA

第四篇 植物蛋白质操作技术

实验二十二植物蛋白质――超氧化物歧化酶的分离纯化

实验二十三植物蛋白质双向电泳技术

实验二十四DNA固定化分离植物DNA结合蛋白

实验二十五ELISA技术分析植物蛋白质的表达

实验二十六Western杂交检测植物蛋白质的表达

实验二十七酵母双杂交技术分析植物蛋白相互作用

实验二十八植物蛋白质磷酸化修饰

实验二十九植物蛋白质与核酸相互作用

第五篇 生物信息学技术

实验三十生物信息学网站基础知识

实验三十一核酸序列分析

实验三十二蛋白质序列分析

附录

附录一分子生物学常用试剂的配制

附录二分子生物学实验技术和生物信息学综合网址

参考文献

《国家级实验教学示范中心植物学科系列实验教材：植物分子生物学技术实验指导》以植物分子生物学技术为主线，从植物分子生物学常用技术、植物DNA操作技术、植物RNA操作技术、植物蛋白质操作技术和生物信息学技术等5个方面介绍32个实验技术。植物分子生物学常用技术主要包括质粒DNA制备、DNA电泳、PCR扩增、Southern杂交、Northern杂交和Western杂交等技术；植物DNA操作技术主要包括植物DNA的提取、酶切片段分离、未知序列TAIL PCR扩增、基因表达载体构建、转基因植物快速鉴定、PCR点突变和农杆菌浸花法转化等实验技术；植物RNA操作技术主要包括植物总RNA提取、cDNA合成、cDNA芯片分析、实时定量PCR、RNAi载体构建、miRNA克隆与表达、RACE技术等实验技术；植物蛋白质操作技术主要包括植物蛋白质分离纯化、双向电泳技术、DNA结合蛋白分离、ELISA分析、酵母双杂交、蛋白质磷酸化修饰、蛋白质与核酸相互作用等实验技术；生物信息学技术主要介绍生物信息学网站基础知识、核酸序列分析和蛋白质序列分析等。
　　《国家级实验教学示范中心植物学科系列实验教材：植物分子生物学技术实验指导》可作为高等院校生命科学相关专业的植物分子生物学实验课程教学用书，同时也可供相关专业研究生、教师与科研工作者开展植物分子生物学科学研究作参考用书。