蛋白质电泳技术指南

第1章电泳史1

1.1引言1

1.2电泳理论概要1

1.3电泳的发展和分类3

1.3.1界面移动电泳3

1.3.2区带电泳6

1.3.3第二代液相电泳12

1.3.4一些特殊的电泳分支14

参考文献17

第2章蛋白质和多肽的凝胶电泳及检测18

2.1蛋白质和多肽的凝胶电泳技术18

2.1.1非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳19

2.1.2十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳23

2.1.3多肽的凝胶电泳30

2.1.4蛋白质的薄板等电聚焦33

2.1.5蛋白质的双向凝胶电泳36

2.1.6双向荧光差异凝胶电泳43

2.2蛋白质和多肽的凝胶电泳检测技术47

2.2.1蛋白质凝胶的考马斯亮蓝染色48

2.2.2银染52

2.2.3蛋白质凝胶的锌染55

2.2.4蛋白质凝胶电泳的荧光染色技术57

2.2.5翻译后修饰蛋白质的凝胶电泳检测58

致谢61

参考文献61

第3章毛细管电泳63

3.1毛细管电泳简介63

3.1.1毛细管电泳的定义、发展历史63

3.1.2毛细管电泳的若干相关名词64

3.1.3毛细管电泳的基本原理和基本参数65

3.1.4毛细管电泳的主要特点70

3.1.5毛细管电泳技术应用于蛋白质科学71

3.2用于蛋白质和多肽研究的毛细管电泳技术和方法72

3.2.1毛细管电泳中蛋白质和多肽的迁移行为73

3.2.2毛细管区带电泳75

3.2.3毛细管胶束电动色谱78

3.2.4毛细管凝胶电泳79

3.2.5毛细管等电聚焦82

3.2.6毛细管等速电泳84

3.2.7亲和毛细管电泳87

3.2.8毛细管电泳的联用检测技术88

3.2.9毛细管电泳的微量制备技术90

3.2.10发展中的毛细管电泳技术92

3.3蛋白质和多肽的毛细管电泳技术应用于分析生物技术93

3.3.1当代分析技术与生物制品93

3.3.2定性分析94

3.3.3定量分析98

3.3.4纯度分析103

3.3.5异质性分析105

3.3.6稳定性分析106

3.3.7过程的一致性和方法的验证110

3.3.8展望110

3.4毛细管电泳操作维护、常见问题和解决办法111

3.4.1毛细管电泳基本操作和维护111

3.4.2毛细管电泳实验中常见问题和解决办法112

参考文献115

第4章自由流电泳118

4.1引言118

4.2自由流电泳理论120

4.2.1分离原理120

4.2.2影响因素122

4.3自由流电泳仪129

4.3.1自由流电泳仪的一般组成129

4.3.2一些商品化仪器130

4.3.3为克服一些影响因素所作的努力132

4.3.4为提高物料流通量所作的努力135

4.4自由流电泳操作138

4.4.1分离模式138

4.4.2分离缓冲液以及分离介质等的选择141

4.4.3缓冲液流速、上样速率和电压的选择144

4.4.4其他因素145

4.4.5自由流电泳的操作步骤146

4.5自由流电泳的应用147

4.5.1小分子147

4.5.2蛋白质148

4.5.3一些特殊物质150

4.5.4膜物质150

4.5.5细胞151

4.5.6在蛋白质组学中的应用154

4.5.7在空间微重力下分离蛋白质和细胞155

4.6结语155

参考文献155

第5章毛细管电泳多维分离检测新技术166

5.1多维毛细管电泳方法概述166

5.1.1高效液相色谱-毛细管电泳多维分离技术169

5.1.2毛细管电泳-毛细管电泳多维分离技术176

5.2高效液相色谱-毛细管电泳二维分离技术178

5.2.1反相液相色谱-毛细管电泳?质谱联用系统178

5.2.2反相液相色谱-毛细管等电聚焦电泳?全柱成像系统185

5.3毛细管电泳-毛细管电泳二维分离技术191

5.3.1单细胞中蛋白质的二维毛细管电泳分离191

5.3.2芯片上二维电泳分离蛋白质酶解肽样品195

参考文献198

后记200

　　本书是《蛋白质科学与技术丛书》的一个分册。作者借助简明和轻松的笔调为我们展现了：电泳技术发展简史；各类凝胶电泳实验技术之操作流程与注意事项；毛细管电泳技术、方法及其应用；自由流电泳理论、操作、仪器与应用；毛细管电泳多维分离检测新技术。本书内容丰富，讲解深入浅出，具有很强的实用性。　　本书是《蛋白质科学与技术丛书》的一个分册，由国内蛋白质电泳领域颇有声望的资深专家撰写。作者借助简明和轻松的笔调为我们展现了：电泳技术发展简史；各类凝胶电泳实验技术之操作流程与注意事项；毛细管电泳技术、方法及其应用；自由流电泳理论、操作、仪器与应用；毛细管电泳多维分离检测新技术。