分子生物学实验指导

分子生物学实验室规则

第一部分  基础实验

实验1  细胞基因组DNA的提取

实验2  酵母细胞总RNA的提取

实验3  大肠杆菌质粒DNA的提取

实验4  琼脂糖凝胶电泳分析及DNA片段的回收

实验5  聚合酶链式反应扩增目的基因片段

实验6  质粒DNA及PcR产物酶切后纯化、回收

实验7  DNA分子的体外重组

实验8  大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA转化实验

实验9  α—互补实验及重组质粒DNA的酶切鉴定分析

实验10  重组工程菌的诱导表达实验

实验11  SDS—PAGE凝胶电泳分析蛋白产物

实验12  Southern杂交实验

实验13  Northern杂交实验

实验14  Western杂交实验

第二部分  综合（创新）实验

大豆Glycinin G2蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达研究

生物技术综合实验设计作业

实验报告写作要求

附录  常用数据、试剂配制、酶切位点等查询

1  常用核酸蛋白换算数据

2  常用琼脂糖凝胶电泳缓冲液的配制

3  Luria—Bertani培养基配制

4  质粒提取所需试剂配制

5  TE缓冲液的配制（pH 8.0）

6  抗生素的使用浓度

7  IPTG储存液的配制（0.1 mol／L）

8  X—gal储存液的配制（50 mg／mL）

9  SDS—PAGE凝胶电泳试剂

10  考马斯亮蓝染色液的配制（100 mL）

11  SDS凝胶脱色液的配制（100 mL）

12  丙烯酰胺凝胶电泳胶的配制

附表1  配制SDS—PAGE丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所需溶液

附表2  配制SDS—PAGE丙烯酰胺凝胶电泳5％浓缩胶所需溶液

附表3  常用核酸的长度与相对分子质量

附表4  常用DNA相对分子质量标准参照物

附表5  常用蛋白质相对分子质量标准参照物

附表6  氨基酸名称、缩写及其密码子

附表7  常用压力单位换算表

附表8  常用限制性内切酶酶切反应温度及识别位点一览表

参考文献

《分子生物学实验指导/21世纪高等院校生命科学实验系列教材》的实验内容均为现代分子生物学和基因工程所涉及的基本实验理论、原理和实验方法。内容包括核酸的分离纯化技术；琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术；PCR基因扩增的原理和技术；常用限制性内切酶和酶切技术；基因的克隆技术包括感受态细胞的制备和转化，质粒的提取和酶切鉴定技术；外源基因在原核细胞的表达及检测技术；分子杂交技术。按36个学时一个学分，共设计12个实验内容，此外附加一个分子生物学综合实验内容。

《21世纪高等院校生命科学实验系列教材:分子生物学实验指导》由华南理工大学出版社出版。