免疫学实验

第一篇基本实验操作技术

第1章血液标本的采集

实验一人血液标本的采集

实验二动物血液标本的采集及动物处死方法

第2章细胞计数及活性测定

实验三细胞计数的方法

实验四细胞活力测定

第3章细胞培养

实验五细胞培养用器材的准备与无菌操作

实验六原代细胞培养

实验七细胞传代培养

实验八细胞的冻存与复苏

第4章动物模型的建立

实验九免疫功能低下动物模型

实验十移植性肿瘤动物模型

第5章实验动物给药方法

实验十一实验动物的捉持与固定

实验十二实验动物的给药方法

第6章目的基因的克隆与表达

实验十三RT-PCR扩增小鼠IL-2基因

实验十四小鼠IL-2原核表达质粒的构建

实验十五重组mIL-2的诱导表达及SDS-PAGE鉴定

实验十六重组mIL-2的亲合层析纯化及浓度测定

第二篇经典验证性实验

第7章凝集反应

实验十七玻片凝集试验

实验十八试管凝集试验

实验十九间接凝集试验

实验二十协同凝集试验

第8章沉淀反应

实验二十一单向琼脂扩散

实验二十二双向琼脂扩散

实验二十三对流免疫电泳

实验二十四免疫电泳

实验二十五火箭免疫电泳

实验二十六交叉免疫电泳

实验二十七免疫比浊

第9章补体参与的免疫反应

实验二十八溶血试验

实验二十九血清总补体活性测定

实验三十补体依赖的细胞毒试验

第lO章免疫标记技术

实验三十一酶联免疫吸附试验

实验三十二酶联免疫斑点(EILISPOT)技术检测淋巴细胞分泌活性

实验三十三间接免疫荧光法检测人外周血T细胞亚群

实验三十四胶体金的制备

实验三十五免疫金的制备

实验三十六胶体金斑点层析技术检测早期妊娠

实验三十七中性粒细胞吞噬功能的化学发光测定

第11章免疫细胞的分离纯化

实验三十八沉降法分离外周血白细胞

实验三十九密度梯度离心法分离外周血单个核细胞

实验四十小鼠脾细胞的制备

实验四十一小鼠胸腺细胞的制备

实验四十二小鼠骨髓树突状细胞的制备

实验四十三小鼠腹腔巨噬细胞的制备

第12章吞噬细胞功能测定

实验四十四硝基四氮唑蓝还原试验

实验四十五细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能

实验四十六巨噬细胞吞噬功能测定

实验四十七中性粒细胞趋化功能测定

第13章超敏反应

实验四十八豚鼠过敏反应

实验四十九皮肤速发型超敏反应

实验五十血清总IgE测定

实验五十一特异性IgE的测定

第三篇综合性实验

第14章多克隆抗体的制备

实验五十二免疫血清的制备

实验五十三免疫血清的鉴定与纯化

第15章单克隆抗体的制备

实验五十四动物的选择与免疫

实验五十五细胞融合

实验五十六杂交瘤的筛选与克隆

实验五十七单克隆抗体的制备与鉴定

实验五十八单克隆抗体Fab片段的制备

第16章免疫印迹

实验五十九免疫印迹技术

第17章免疫细胞检测

实验六十溶血空斑试验

实验六十一APAAP桥联酶标法检测T细胞亚群

实验六十二流式细胞术检测T细胞亚群

第18章免疫细胞功能检测

实验六十三淋巴细胞增殖试验

实验六十四混合淋巴细胞反应

买验六十五NK细胞活性测定

实验六十六细胞毒性T淋巴细胞活性测定

第19章细胞因子的检测

实验六十七白细胞介素-2活性的检测

实验六十八肿瘤坏死因子的生物学活性检测

第20章细胞凋亡的检测

实验六十九凝胶电泳法检测小鼠胸腺细胞凋亡

实验七十末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡

实验七十一流式细胞术检测细胞凋亡

第四篇临床免疫实验

第21章感染性疾病的免疫学检测

实验七十二IgM捕获法检测TORCH感染特异性IgM抗体

实验七十三双抗原夹心ELISA法检测人类免疫缺陷病毒抗体

实验七十四ELISA法检测乙型肝炎病毒抗原及特异性抗体

买验七十五IgM捕获法检测甲型肝炎病毒特异性IgM抗体

第22章肿瘤标志物的检测

买验七十六微粒子化学发光免疫法检测甲胎蛋白

实验七十七微粒子化学发光免疫法检测癌胚抗原

买验七十八微粒子化学发光免疫法检测其他肿瘤相关抗原

第23章自身免疫性疾病的检测

买验七十九斑点酶免疫法检测抗ENA抗体

买验八十ELISA检测抗甲状腺球蛋白抗体

第24章内分泌疾病的免疫学检测

实验八十一电化学发光免疫法检测甲状腺激素

实验八十二电化学发光免疫法检测雌二醇

第25章血液药物浓度的检测

实验八十三荧光偏振免疫法测定血液环孢素浓度

实验八十四荧光偏振免疫法测定血液卡马西平浓度

实验八十五微粒子酶免分析法测定血液地高辛浓度

第五篇创新性实验

第26章实验的选题、设计、实施与总结

第27章创新性实验参考选题

附录1常用实验仪器设备简介

附录2常用试剂配制

　　本书分五篇共27章，包括85个实验，完全能够满足各层次、各专业免疫学教学的需求。其中基础实验操作技术包含了现代免疫学的基本技术及科研中常用方法技术，特别是为创新性实验提供了基本技术。经典验证性实验是免疫学最基本的、以验证理论为主的方法技术，能在单元教学时间内完成，适合各专业本科学生教学，主要培养学生的基本操作技能。综合性实验涉及多种技术，大多不能在单元教学时间内完成，属选修性质的实验，培养学生的独立工作能力和综合分析能力。临床免疫实验介绍了部分临床常用免疫学检测技术及其诊断意义，主要培养检验专业学生的实际操作能力，或为某些专业研究生提供特别的实验技术。创新性实验以培养学生基本的科学研究能力为主，对象是研究生或本科生科研小组。　　本书的编写指导思想是打破传统实验教学模式，不受学生专业与层次的限制，以能力培养为主线，推进学生自主学习、研究性学习。对实验教学内容进行分类、整合，形成了基础实验操作技术、经典验证性实验、综合性实验、临床免疫实验、创新性实验五篇，共27章，85个实验。完全能够满足各层次、各专业免疫学教学的需求。在基础实验操作技术中介绍了现代免疫学常用方法技术，例如细胞培养、基因克隆、动物模型的建立等，为创新性实验提供了铺垫。在创新性实验中，提出了有一定覆盖面和代表性的设计选题范例或方向，写作手法以启迪思维为主，但不失指导性与示范性，体现了我们注重学生能力培养所做的探索。临床免疫实验中介绍了目前临床常用的免疫学检验方法在疾病诊断、防治中的应用，例如微粒子酶免疫分析技术、电化学发光免疫测定、荧光偏振免疫测定法等。　　本教材由教学经验和实验室经验丰富的教师编写，力求原理讲解清楚，方法介绍明白，不少内容是作者的经验之谈。全书约32万字，插图57幅。适用于五年制、七年制各专业基础免疫学和临床免疫学实验教学，也可供相关专业的教师、研究生以及从事临床检验、卫生防疫、免疫学研究的实验技术人员使用。