生化分离原理与技术

第一章 绪论

一、生化分离技术发展的历史和地位

二、生化分离技术的研究范畴

三、生化分离技术的应用及发展趋势

思考题

参考文献

第二章 生物样品的预处理

第一节 概述

第二节 动植物材料预处理

一、植物组织提取物的制备

二、动物组织提取物的制备

三、细菌中重组蛋白的提取制备

第三节 细胞的破碎与分离

一、概述

二、常用的几种破碎方法

三、细胞破碎技术研究的发展方向

第四节 沉淀技术

一、概述

二、沉淀方法

第五节 预处理技术实例

一、纳米级微生物细胞破碎原理及实例

二、β-环糊精共沉淀分离法

三、壳聚糖沉淀分离法

思考题

参考文献

第三章 膜分离技术

第一节 概述

一、发展史

二、作用及存在问题

三、分类和定义

第二节 技术原理

一、压力特征

二、浓差极化

三、膜分离理论

四、膜的截留能力

五、膜的污染

六、膜组件的选择

七、膜的选择及使用

第三节 微滤技术

一、概述

二、膜的分类

三、膜的特点和分离机理

四、膜的污染和清洗

第四节 超滤技术

一、概述

二、原理

三、问题及解决措施

四、膜的改性

第五节 纳滤技术

一、概述

二、分离机理

三、纳滤膜

第六节 超微滤操作技术

一、预处理

二、膜的操作

三、膜的清洗和膜性能的再生

第七节 膜分离技术的应用

一、微滤技术应用

二、超滤技术应用

三、纳滤技术应用

思考题

参考文献

第四章 色谱分离技术

第一节 概述

一、色谱的基本概念

二、色谱法的分类

第二节 吸附色谱简介

一、吸附色谱影响因素

二、羟基磷灰石色谱方法介绍

第三节 凝胶过滤色谱

一、凝胶过滤色谱原理

二、凝胶过滤色谱介质

三、凝胶过滤色谱实验技术

四、凝胶过滤色谱的应用

第四节 离子交换色谱

一、离子交换色谱相关理论

二、离子交换色谱介质(离子交换剂)

三、离子交换色谱实验技术

四、离子交换色谱的应用

第五节 亲和色谱

一、基本原理

二、亲和色谱配体

三、亲和吸附剂

四、亲和色谱实验技术

五、亲和色谱的特殊类型

六、亲和色谱的应用

第六节 反相色谱

一、反相色谱原理

二、反相色谱介质

三、反相色谱流动相

四、反相色谱实验技术

五、反相色谱的应用

第七节 疏水作用色谱

一、疏水作用色谱基本原理

二、疏水作用色谱介质

三、疏水作用色谱实验技术

四、疏水作用色谱的应用

第八节 色谱聚焦简介

一、机制简介

二、多组分缓冲剂与多缓冲离子交换剂

三、实验要点

思考题

参考文献

第五章 电泳技术

第一节 概述

一、基本原理

二、凝胶支持介质

三、检测方法

四、电泳仪器

第二节 天然聚丙烯酰胺凝胶电泳

一、基本原理

二、天然聚丙烯酰胺凝胶电泳的类型

三、影响分离效果的因素

四、蛋白质分子量的测定

五、天然聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验方法

六、天然聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用范围

第三节 十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳

一、十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离原理

二、十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳的类型

三、影响分离效果的因素

四、蛋白质亚基分子量的测定

五、十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验方法

六、十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用范围

第四节 等电聚焦

一、原理

二、载体两性电解质和pH梯度的形成

三、载体两性电解质等电聚焦方法

四、固相pH梯度介质及其pH梯度的形成

五、固相pH梯度等电聚焦方法

六、等电聚焦系统的选择

七、等电聚焦的应用范围

第五节 双向电泳

一、样品制备

二、等电聚焦

三、缓冲液置换

四、梯度十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳

五、检测

六、蛋白质图谱分析

七、应用

第六节 免疫电泳

一、原理

二、免疫电泳类型

三、免疫电泳技术

四、电泳方法

五、应用

第七节 蛋白质印迹

一、原理

二、试验材料的选择

三、蛋白质印迹试验方法

四、应用

第八节 毛细管电泳

一、原理

二、毛细管电泳的主要类型

三、毛细管电泳仪

四、影响毛细管电泳分离的主要因素

五、毛细管电泳过程

六、毛细管电泳的应用

思考题

参考文献

第六章 其他分离技术

第一节 离心分离技术

一、概述

二、基本原理和计算

三、超离心技术

第二节 泡沫分离技术

一、分类

二、基本原理

三、操作方式及其影响因素

四、泡沫分离的应用

第三节 膜分离集成技术

一、概述

二、原理和特点

三、膜色谱介质材料及其组件

四、膜色谱的制备

五、膜色谱的应用

第四节 模拟移动床简介

一、概述

二、工作原理

三、模拟移动床模型

四、模拟移动床的应用

思考题

参考文献

第七章 分离方案的设计

第一节 概述

第二节 分离的主要流程

一、建立分析方法

二、提取材料选择

三、提取方法选择

四、分离纯化方法的探索

五、均一性的鉴定

第三节 分离技术的选择和组合

一、单元分离技术的选择

二、融合技术或称集成分离技术

三、分离技术组合方案的选择原则

第四节 典型生物分子分离实例分析

一、蛋白质（酶）的分离纯化与鉴定

二、核酸的分离纯化与鉴定

三、多糖的分离纯化与鉴定

四、小分子物质的分离与鉴定

思考题

参考文献

附录 生化分离实验部分

系列实验1 凝胶色谱法测定蛋白质相对分子质量

一、实验目的

二、实验原理

三、实验器材和试剂

四、实验操作

五、实验结果分析与处理

系列实验2 酵母蔗糖酶的提取与纯化

一、实验目的

二、实验过程

《生化分离原理与技术》对一些经典技术的原理进行了较为系统的论述，结合近年来新的应用实例来说明这些技术在应用上的拓展以及以它们为基础发展出来的融和技术的特点。重要特色如下：专门编入了分离方案设计的内容，因为生化分离过程往往是将若干单元纯化技术联合使用而实现的，在此过程中，选择合理单元纯化技术固然很重要，然而如何将这些技术合理地组合和按顺序使用也是成功分离所必须考虑的。
　　每章后增附相应的思考题，是笔者多年来在教学方面的一些积累，可帮助读者更好地学习和掌握各种分离技术的原理。
　　技术的真正掌握和运用尚需经过实验的实践过程，这是《生化分离原理与技术》仍保留最经典的两个分离实验的主要原因。
　　《生化分离原理与技术》可以作为生物工程、生物技术、发酵工程、生化工程、食品工程等专业的本科或研究生教材，也可供从事生物分离方向研究的技术人员参考。