中医药研究常用分子生物学技术

第一章绪论

一、分子生物学技术在中医药研究中的实例

二、分子生物学技术在中医药研究中的现状

三、中医药研究经常使用的分子生物学技术及本书的安排

四、加强分子生物学技术在中医药研发中的应用，是新时期中医药继承与发展的迫切需要

第二章分子生物学常用基本技术

第一节重组质粒

第二节质粒转化大肠杆菌

第三节阳性单菌落扩增与小量DNA制备

第四节酶切重组质粒，电泳分离所插入的DNA

第五节从凝胶中回收DNA

附：琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒及其方法

第六节大量质粒DNA制备

第七节哺乳类动物细胞的培养

附：细胞库简介

第八节植物细胞悬浮培养

第九节气相色谱一质谱联用

第十节流式细胞仪分析

第三章DNA的研究方法

第一节哺乳类动物基因组DNA的提取

第二节植物基因组DNA的提取

第三节基因组文库的建立与筛选

第四节DNA印迹杂交

第五节聚合酶链式反应

附：多重PCR

第六节DNA双脱氧链终止法测序

第七节动、植物药材的ISSR指纹图谱

第八节中药RAPD指纹图谱

第四章RNA的研究方法

第一节总RNA提取

第二节mRNA的分离

第三节RNA印迹杂交

第四节反转录聚合酶链式反应

第五节荧光实时定量PCR

第六节原位杂交

第七节基因芯片

第八节cDNA矩阵

第九节差异展示PCR

第十节cDNA库建立

第十一节基因全序列cDNA库筛选

第十二节迅速扩增cDNA末端的PCR技术

第五章蛋白质的研究方法

第一节哺乳类动物组织蛋白质的提取

第二节植物组织蛋白质的提取

第三节蛋白质印迹杂交

第四节酶联免疫吸附试验

第五节免疫组织化学

第六节单克隆抗体制备技术

第七节蛋白质双向电泳

第六章基因功能与表达调控的研究方法

第一节RNA干扰

第二节smallRNA的提取与分析

第三节报道基因与基因调控元件的检测

第四节点突变PCR

第五节基因敲除

第六节DNA酶I足迹法

第七节凝胶阻滞分析

第八节植物细胞的基因转化

第七章分子生物学常用网络资源及利用

第一节美国国家生物技术信息中心(NCBD)

第二节GenBank数据库查询与搜索

第三节基础局部比对搜索工具(BLAST)

第四节EST的电子延伸

第五节cDNA序列的蛋白阅读框架分析(ORF)、染色体定位，及其在机体各组织中的表达预测

第六节PCR引物或序列寡核苷酸探针的在线设计

第七节蛋白质分析

附录

一、分子生物学实验常用仪器设备

二、常用生物学数据

三、常用载体

四、分子克隆常用酶

五、常用储存液的配制

六、常用液体培养基

七、常用缓冲液

八、常用酸碱溶液的浓度与分子量

九、不同浓度酸碱液的pH值

十、核酸的纯化(用酚／氯仿抽提)

十一、核酸浓缩

十二、分光光度法测定DNA及RNA含量

十三、Sephadex的水化

十四、放射性度量单位和数据

十五、科学单位

十六、离心速度和离心力换算

十七、分子生物学名词术语英汉对照

　　本教材根据卫生部教材办公室的统一要求，从中医药研究实际出发，常用分子生物学技术及其在中医药研究中的运用，以加强中医药研究生的科研思维、方法和能力的培养，着重解决能否用、为何用、怎样用的问题，更好地促进中医药的研究与发展。本书分7个部分：一是绪论。介绍分子生物学技术在中医药研发中应用的现状，深入浅出地介绍如何用和怎样用以及本书各章节的结构与不同技术间的关系。二是分子生物学常用基本技术。三是DNA的研究方法。四是RNA的研究方法。五是蛋白质的研究方法。六是基因功能与表达调控的研究方法。七是分子生物学常用网络资源及利用。本书适用于中医药专业的研究生以及非中医药学科从事分子生物学领域研究的研究生及其工作者。