基因克隆理论与技术

上篇基因克隆理论

第一章概论

第一节基因研究历史回顾

第二节遗传的物质基础

第三节基因和基因克隆的概念

第四节基因工程的研究内容和安全性

第二章基因的结构和功能

第一节核酸的结构和功能

第二节遗传物质的组织结构

第三节基因组的结构和功能

第三章蛋白质的结构和功能

第一节蛋白质的基本单位和分类

第二节蛋白质的分子结构和理化性质

第三节蛋白质的生物学功能

第四章基因克隆中常用的工具酶

第一节限制性核酸内切酶

第二节DNA聚合酶

第三节DNA连接酶

第四节修饰酶

第五章基因克隆的载体

第一节质粒载体

第二节噬菌体载体

第三节病毒载体

第四节大容量载体

第六章基因的表达和调控

第一节原核生物基因的表达调控

第二节真核生物基因的表达调控

第七章基因克隆在治疗和诊断中的应用与进展

第一节基因治疗研究进展

第二节基因诊断的研究进展

第八章基因克隆技术在生物制药中的应用

第一节概况

第二节基因工程药物

第三节基因工程抗体

第四节基因工程疫苗

第五节核酸疫苗

第六节生物医药的发展方向

下篇基因克隆技术

第九章分子生物实验中的常用仪器及试剂的配制

第一节分子生物实验室的常规仪器及设备

第二节常用试剂的配制

第十章琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳

第一节原理

第二节琼脂糖电泳

第三节聚丙烯酰胺凝胶电泳

第四节电泳的影响因素

第五节电泳中常用的指示剂和染色剂

第十一章目的基因克隆

第一节化学合成法获取目的基因

第二节PCR扩增法获取目的基因

第三节RT-PCR法获取目的基因

第十二章载体的准备

第一节感受态细胞的制备和质粒的转化

第二节质粒DNA的提取

第十三章目的基因与载体的连接

第一节目的基因和载体的酶切

第二节从凝胶中回收DNA

第三节目的基因和载体的连接

第十四章重组载体的检测

第一节酶切和电泳检测

第二节DNA序列测序鉴定

第十五章重组载体的转染

第一节磷酸钙共沉淀法

第二节脂质体法

第三节反转录病毒感染法

第四节腺病毒载体转染法

第五节结果和转染方法的选择

第十六章重组体插入基因、RNA和表达产物蛋白质的检测

第一节Soulhemblot

第二节Northernblot

第三节Westernblot

第十七章大鼠BDNF基因的构建及骨髓间充质千细胞转染

第一节实验原理与实验目的

第二节实验设备、试剂及配制

第三节实验步骤

第十八章纳米粒子介导人生存素基因修饰嗅鞘细胞实验

第一节实验原理

第二节实验所需设备、试剂及其配制

第三节实验步骤

第四节实验结果

第五节结果分析

第十九章小鼠NT-4基因的体外构建、骨髓间充质干细胞转染和脑内移植

第一节实验目的及实验原理

第二节小鼠NT-4基因的体外构建及骨髓间充质干细胞转染

第三节NT-4-GFP转基因骨髓间充质干细胞脑内移植

第四节结果分析与经验体会

彩图

　　《基因克隆理论与技术》是《21世纪生物技术丛书》的一个分册，是分子生物学研究的重要工具。本书于2005年出版，2006年进行第二次印刷。随着当今生物技术的迅速发展和需求日益扩大，现予以再版。　　全书分上、下篇，由第一版的16章增至19章，是国内生物科学领域中较全、较新的一本全面阐述基因克隆的基本理论和实验技术的学术著作。上篇介绍了基因的结构与功能、蛋白质的结构与功能、基因的调控等分子生物学的基本理论，并介绍了基因克隆的载体、基因克隆的工具酶等以及基因克隆技术在诊断、治疗及生物制药中的应用与进展。下篇在第一版基础上增加了基因构建，干细胞转染，以及较新的纳米载体实验技术。从而使本书全面而更具操作性。　　本书可供生物医学专业研究生、本科学生以及从事分子生物学研究的科研人员阅读和实验时参考。