生物化学与分子生物学实验

第一篇 实验技术与原理

第一章 实验材料的预处理

第二章 提取与沉淀分离技术

第三章 过滤与膜分离技术

第四章 萃取分离技术

第五章 离心技术

第六章 层析技术

第七章 电泳技术

第八章 聚合酶链式反应技术

第九章 核酸杂交技术

第十章 光谱检测技术

第二篇 实验模块与内容

模块一 氨基酸分析与测定

实验1-1 氨基酸纸层析分析

实验1-2 氨基酸纤维素薄层层析

实验1-3 植物组织中游离氨基酸总量的测定

模块二 植物组织中可溶性蛋白质的提取与含量测定

实验2-1 紫外吸收法测定蛋白质含量

实验2-2 考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量

实验2-3 微量凯氏定氮法测定粗蛋白质含量

实验2-4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量

实验2-5 植物组织中丙酮酸含量的测定

实验2-6 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质

模块三 酶的分离、纯化与测定

实验3-1 马铃薯多酚氧化酶的制备及性质

实验3-2 唾液淀粉酶的基本性质

实验3-3 蔗糖酶米氏常数的测定

实验3-4 温度与pH对蔗糖酶活力的影响

实验3-5 酵母蔗糖酶的分离纯化

实验3-6 淀粉酶的提取和活力测定

实验3-7 血清转氨酶活力的测定

实验3-8 过氧化物同工酶聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳

模块四 维生素含量的测定

实验4-1 维生素C含量的测定——2，6-二氯酚靛酚滴定法

实验4-2 维生素C含量的测定——荧光法

实验4-3 维生素B2含量的测定——荧光法

模块五 糖类的提取、分离与测定

实验5-1 3，5-二硝基水杨酸法测定还原糖含量

实验5-2 邻甲苯胺法测定血清葡萄糖的含量

实验5-3 菌类多糖的分离提取与含量测定

模块六 脂质提取与测定

实验6-1 粗脂肪的提取和含量的测定——索氏提取法

实验6-2 游离脂肪酸含量的快速测定

实验6-3 卵磷脂的提取及鉴定

模块七 核酸操作技术

实验7-1 植物总DNA的提取（CTAB法）

实验7-2 动物肝总DNA的提取

实验7-3 植物总RNA的提取

实验7-4 PCR技术

实验7-5 质粒DNA的提取

实验7-6 质粒DNA的酶切分析

实验7-7 琼脂糖凝胶电泳

实验7-8 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化

参考文献

附录

一、实验室安全知识及实验注意事项

二、常用缓冲溶液的配制

三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制

四、蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制

五、硫酸铵饱和度的常用表

《生物化学与分子生物学实验/iCourse·教材·高等农林院校基础课程系列》全面介绍了生物化学和分子生物学实验的基本理论及其技术，包括实验技术与原理、实验模块与内容两篇。“实验技术与原理”篇对基础实验技术的一般原理和离心技术、层析技术、电泳技术、PCR技术、核酸杂交技术和光谱检测技术进行了较系统和全面的介绍。“实验模块与内容”篇共选编34个实验项目，既有训练学生基本操作技能的传统实验，也有设计性及综合性实验。所有实验均附思考题，以提高学生分析问题和解决问题的能力。围绕实验体系，《生物化学与分子生物学实验/iCourse·教材·高等农林院校基础课程系列》配套数字资源包括要点解析、操作视频、拓展阅读和答案提示等，以引导学生自主学习，掌握相关技能点和知识点。
　　《生物化学与分子生物学实验/iCourse·教材·高等农林院校基础课程系列》适于高等农林院校植物生产类及生物类本科生教学使用，也可作为研究生及有关科研人员的参考书。