生物化学与生化药品实验

第一章生物化学实验基本方法1

第一节实验室规划1

第二节实验室安全及防护常识2

一、实验室安全知识2

二、实验室急救2

第三节实验记录与实验报告5

一、实验记录5

二、实验报告6

第四节实验室常用仪器的使用7

一、计量仪器7

二、台秤10

三、分析天平11

四、电子分析天平13

五、恒温箱13

六、电热恒温水浴14

七、分光光度计14

八、电动离心机16

九、酸度计(DELTA320-SpH计)17

十、自动部分收集器18

第五节实验室基本操作和实验室常识19

一、液体的盛放和储存19

二、器皿的清洗与干燥19

三、配制溶液20

四、搅拌与振荡22

五、沉淀的过滤和洗涤23

六、实验室常识24

第二章现代生物化学基本实验技术25

第一节层析技术25

一、基本原理25

二、层析法的分类25

三、离子交换层析26

四、凝胶层析30

五、亲和层析36

六、高效液相色谱39

七、分配层析40

第二节离心技术44

一、基本原理44

二、离心机的类型44

三、制备性超速离心的分离方法46

四、离心操作的注意事项47

第三节电泳技术48

一、基本原理48

二、电泳技术的分类和特点49

三、影响电泳的因素49

四、常用电泳技术50

第四节分光光度技术52

一、基本原理53

二、分光光度计的结构54

三、分光光度技术的应用56

第五节免疫化学技术57

一、免疫化学技术简介57

二、抗原的免疫原性和专一性57

三、抗体的结构和功能58

四、抗原抗体的结合59

五、动物的常规免疫61

六、双向免疫扩散及免疫电泳62

七、酶联免疫吸附分析63

第三章生物化学与生化药品基础实验65

实验一总糖和还原糖的测定(一)65

实验二总糖和还原糖的测定(二)68

实验三粗脂肪的测定70

实验四血清总胆固醇的测定72

实验五脂肪碘值的测定74

实验六氨基酸分离与鉴定双向层析76

实验七蛋白质的定量测定(一)凯氏定氮法79

实验八蛋白质的定量测定(二)Folin酚法82

实验九蛋白质的定量测定(三)考马斯亮蓝染色法84

实验十牛乳中酪蛋白的制备86

实验十一质粒DNA的微量制备87

实验十二小牛胸腺DNA的制备浓盐法90

实验十三核酸的定量测定(一)紫外吸收法92

实验十四核酸的定量测定(二)定磷法94

实验十五核酸的定量测定(三)定糖法(地衣酚法)96

实验十六酶的特性底物专一性98

实验十七底物浓度对酶促反应速度的影响100

实验十八淀粉酶活力测定102

实验十九影响酶促反应的因素103

实验二十果蔬维生素C定量测定106

实验二十一糖酵解中间产物的鉴定109

实验二十二肌糖原的酵解作用111

实验二十三脂肪酸的β?氧化113

实验二十四氨基移换反应(一)115

实验二十五氨基移换反应(二)117

第四章生物化学技术性实验119

实验二十六蛋白质相对分子质量的测定119

实验二十七聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白126

实验二十八不同分子量蛋白质的分离凝胶柱层析法129

实验二十九醋酸纤维素薄膜分离血清蛋白132

实验三十离子交换层析分离氨基酸134

第五章生化药物综合性实验136

实验三十一酵母RNA的提取及组分鉴定136

实验三十二血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定138

实验三十三胰蛋白酶的制备及活力的测定142

附录145

一、常用缓冲液的配制方法145

二、常用酸碱指示剂的配制方法147

　　本书是生物技术系列之一，为高职高专规划教材，系统地介绍了生物化学与生化药品实验的主要技术理论和技术方法，包括分光光度技术、电泳技术、层析技术、离心技术和免疫化学技术。根据不同的教学目标，将实验内容组合为基础实验、技术性实验和综合性实验三部分，由33个实验项目组成，内容涉及糖、脂类、蛋白质、核酸、酶、维生素及代谢途径多个方面。本教材可供高职高专院校生物技术、生物制药、微生物技术、药学等专业使用，也可供高等医药院校临床医学、检验和护理等各专业的本、专科学生使用，还可供从事生物化学和生物制药研究及生产的实验技术人员参考。　　本书为高职高专规划教材，系统地介绍了生物化学与生化药品实验的主要技术理论和技术方法，包括分光光度技术、电泳技术、层析技术、离心技术和免疫化学技术。根据不同的教学目标，将实验内容组合为基础实验、技术性实验和综合性实验三部分，由33个实验项目组成，内容涉及糖、脂类、蛋白质、核酸、酶、维生素及代谢途径多个方面，各学校可根据不同教学层次和对象酌情选用。　　本教材可供高职高专院校生物技术、生物制药、微生物技术、药学等专业使用，也可供高等医药院校临床医学、检验和护理等各专业的本、专科学生使用，还可供从事生物化学和生物制药研究及生产的实验技术人员参考。