分子克隆手册

译者序

前言

1 了解蛋白质相互作用的意义

2 信号转导和哺乳动物细胞生长：问题及范例

3 蛋白质相互作用技术对肿瘤生物学与药物遗传学的影响

4 用GST融合蛋白鉴定蛋白质——蛋白质相互作用

5 通过免疫共沉泻淀法鉴定相互作用蛋白质

6 化学交联技术在研究蛋白质相互作用中的应用

7 研究蛋白质——蛋白质相互作用的酵母和细菌双杂交筛选系统

8 利用噬菌体展示技术研究蛋白质——蛋白质相互作用

9 在出芽酵母中鉴定蛋白质——蛋白质相互作用的遗传学策略

10 研究蛋白质相互作用的FRET显微成像技术

11 绿色荧光蛋白邻近成像（GFP-PRIM）检测同型蛋白质间相互作用

12 质谱表征多元蛋白质复合物

13 用原子力显微技术检测配体——受体间相互作用

14 Biacore表面等离子体共振分析相互作用的蛋白质

15 石英晶体微平衡生物传感器在蛋白质相互作用分析中的应用

16 蛋白酶足迹法

17 串联亲和纯化提高相互作用蛋白质的识别

18 逆转循环纯化蛋白质

19 利用体外表达克隆鉴定相互作用蛋白质

20 用蟾蜍卵提取物修饰重组蛋白

21 采用λ阻遏物融合技术分离和鉴定自组装结构域

22 基于膜的酵母双杂交体系

23 β-半乳糖苷酶互补实验对活细胞中蛋白质间相互作用的检测

24 双杂产系研究胞内蛋白质和单链抗体的相互作用

25 利用蛋白质片段互补策略研究蛋白质相互作用和文库筛选

26 基于cAMP信号级联的一种细菌双杂交系统

27 肽适配子与蛋白质功能白质网络系统研究

28 用渐增截断方法产生蛋白质

29 蛋白蛋家族的新成员——催化抗体

30 通过核糖体展示进行蛋白质——配体相互作用的体外筛选和进化

31 用膜上肽合成的方法分析蛋白质相互作用

32 蛋白成束增强蛋白质——蛋白质相互作用检测

33 用计算方法分析全基因组蛋白质相互作用

34 蛋白质——蛋白质相互作用的可视化和整合

35 通过调节蛋白质——蛋白质之间相互作用发展新的治疗方法

附录1 注意事项

附录2 供应商

索引

研究蛋白质——蛋白质相互作用，不仅可以从分子水平揭示蛋白质的功能，而且对于提示生长、发育、分化和凋亡等生命活动规律至关重要，为探讨重大疾病的机理、疾病治疗、疾病预防和新药开发提供重要的理论基础。　　本书共35章。首先介绍了信号转导和人类遗传学/药物基因组学等问题，并强调蛋白质——蛋白质相互作用在其中发挥关键作用。然后分三部分介绍了如下内容：6个基于标准分子生物学、生物化学和微生物学技术建立起来的、用于分析蛋白质——蛋白质相互作用的方法；6种鉴定和识别蛋白质——蛋白质相互作用的生物物理学方法；近期改进过的与GST沉降和免疫沉淀相关技术、两个补体系统、渐增截断方法、蛋白成束、高通量方法。最后讨论蛋白质——蛋白质相互作用数据的整合及模型构建，以及这些模型在临床治疗方面的应用。　　本书内容详尽、具体，为蛋白质——蛋白质相互作用研究的关键技术提供操作指南，并提供大量识别和操作蛋白质的技术和相关综述，覆盖了迄今最完全、最有效的分析蛋白质——蛋白质相互作用的技术及原理，从理论的阐述到相关方案的列举和比对，包括经典的分子生物学、生物化学和微生物学方法、生物物理学方法、计算分析和相互作用模型的构建等，系统性好，浏览方便，是生命科学研究者很好的工具书。