生物化学与分子生物学实验

实验室总则

第一篇 基础性实验

第一章 生物化学与分子生物学实验基本操作

第二章 分光光度法

实验一 血清蛋白质含量测定

实验二 DNA及RNA含量测定

实验三 血糖浓度测定

实验四 血清甘油三酯测定

实验五 血清总胆固醇含量的测定

实验六 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定

第三章 层析技术

实验七 聚酰胺薄膜层析技术——蛋白质及肽的N末端氨基酸DNS分析法

实验八 凝胶层析（分子筛层析法）分离蛋白质

实验九 离子交换层析分离氨基酸

实验十 亲和层析纯化血清IgG

第四章 电泳技术

实验十一 血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳

实验十二 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白

实验十三 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶

实验十四 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量

实验十五 等电聚焦一聚丙烯酰胺凝胶平板电泳测定蛋白质等电点

实验十六 DNA琼脂糖凝胶电泳

第五章 印迹技术

实验十七 Southern印迹

实验十八 Northern印迹

实验十九 Western印迹

实验二十 非放射性Dig-dUTP标记DNA探针及杂交检测

第二篇 综合性实验

第六章 蛋白质定量分析方法学比较

实验二十一 Lowry改良法测定蛋白质浓度

实验二十二 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度

实验二十三 二喹啉甲酸法测定蛋白质浓度

实验二十四 紫外分光光度法测定蛋白质浓度

第七章 酶分离纯化与动力学分析

实验二十五 碱性磷酸酶分离纯化及比活性测定

实验二十六 碱性磷酸酶初速度的测定

实验二十七 碱性磷酸酶km值测定

实验二十八 pH、温度及抑制剂对碱性磷酸酶活性的影响

第八章 DNA提取、扩增与测序

实验二十九 质粒DNA的提取

实验三十 基因组DNA的提取

实验三十一 聚合酶链反应

实验三十二 DNA序列测定

第九章 RNA提取与鉴定

实验三十三 细胞RNA的提取

实验三十四 逆转录一聚合酶链反应

实验三十五 荧光定量PCR

第十章 基因克隆

实验三十六 目的基因与质粒的限制性内切酶消化

实验三十七 目的基因与质粒DNA的连接

实验三十八 质粒DNA的转化和筛选

第三篇 研究性实验

实验三十九 胰岛素和肾上腺素对血糖及肝糖原的影响

实验四十 血清y-球蛋白的分离纯化与鉴定

实验四十一 青豌豆素的分离纯化及其鉴定

实验四十二 外源基因在原核细胞的表达

实验四十三 蛋白质与DNA的相互作用分析

主要参考文献

附录

《生物化学与分子生物学实验（第2版）/高等医药院校基础医学验教学系列教材》由十章四十三项实验组成，共分三篇：第一篇为基础性实验，共五章，包括生物化学与分子生物学实验基本操作、分光光度法、层析技术、电泳技术和印迹技术，其为生物化学与分子生物学实验中最基本的实验技能：第二篇为综合性实验，共五章，包括蛋白质定量分析方法学比较（Lowry改良法、考马斯亮蓝法等），酶分离纯化与动力学分析，DNA提取、扩增与测序、RNA提取与鉴定以及基因克隆，通过综合性实验介绍实验技术方法的应用；第三篇为研究性实验，包括胰岛素和肾上腺素对血糖及肝糖原的影响、血清，y-球蛋白的分离纯化与鉴定、青豌豆素的分离纯化与鉴定、外源基因在原核细胞的表达及蛋白质与DNA的相互作用分析。《生物化学与分子生物学实验（第2版）/高等医药院校基础医学验教学系列教材》在阐明各类方法基本原理的同时，注重实验的具体操作和实例的应用。
　　《生物化学与分子生物学实验（第2版）/高等医药院校基础医学验教学系列教材》适用于四年制、五年制临床医学及非临床医学各专业、七年制临床医学的实验教学，也可作为医学专科、硕士研究生各专业学生的实验教材，同时也供非医学专业学生学习生物化学与分子生物学技术参考。