第3节 聚合酶链式反应技术
课时过关·能力提升
一、基础巩固
1.下列有关PCR技术的说法,不正确的是( )
A.PCR技术是在细胞内完成的
B.PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术
C.PCR技术的原理与DNA复制的原理相同
D.PCR技术的前提是有一段已知的目的基因的核苷酸序列
答案:A
解析:PCR技术是在生物体外进行DNA复制的技术,其原理与DNA复制的原理相同,但前提是必须要有一段已知的目的基因的核苷酸序列和根据核苷酸序列合成的引物。
2.变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏,双链解开,但共价键并未断裂。引起变性的因素很多,升高温度、过酸、过碱以及加入变性剂等都能造成核酸变性。PCR的反应过程中,引起变性的因素是( )
A.pH过高 B.pH过低
C.升高温度 D.加入酒精
答案:C
解析:各选项的条件均能导致DNA分子变性,但在PCR反应中,变性后还要进行复制和延伸等过程,过酸、过碱、酒精等能够导致反应过程中的酶变性失活,使DNA扩增不能进行。PCR反应中的DNA聚合酶是耐热的,所以可选用升高温度使DNA变性。
3.下面关于DNA对高温的耐受性的说法,不正确的是( )
A.DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强
B.DNA变性后,即使恢复到常温,活性也不能恢复
C.不同生物的DNA的"变性"温度不一定相同
D.在深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强,其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高
答案:B
解析:DNA变性后,恢复到常温,活性还能恢复。深海热泉附近温度很高,生活在那里的生物的DNA的稳定性也应更高。G与C之间含有三个氢键,T与A之间含有两个氢键,G、C含量越高,DNA分子越稳定。
4.PCR实验的特异性主要取决于( )
A.DNA聚合酶的种类
B.反应体系中模板DNA的量
C.引物序列的结构和长度
D.循环周期的序数
答案:C
解析:PCR过程中要加入两种引物,而PCR扩增的对象就是两种引物之间的DNA序列。
5.在PCR扩增的实验中,加入一种提取物(一种模板DNA片段),但实验得到的产物却有2种DNA。其原因可能是( )
A.基因突变
B. Taq DNA聚合酶发生变异