板的操作。
(2)获得纯净微生物培养物的关键是____________________,为此,必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用________法灭菌,接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时,除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外,还必须_______________________________________以防止空气中的杂菌污染。
(3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基,接种后将培养基置于37 ℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离一般在固体培养基上采用____________法,并将培养皿以______状态放置于适宜温度的恒温箱中,培养12~24小时后,____________________,接种于固体斜面培养基上,37 ℃培养24小时后,得到的纯化菌种在________条件下保存。
解析:(1)LB培养基的主要成分有蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、水、琼脂,其中蛋白胨和酵母提取物为微生物提供碳源、氮源和能源,氯化钠可以调节培养基的渗透压,琼脂作为凝固剂。(2)微生物纯培养的关键是防止外来杂菌的污染,因此操作过程中要严格灭菌,培养器皿和培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌,而接种时要在酒精灯火焰旁进行。(3)大肠杆菌菌种分离采用划线分离法,接种后将培养皿置于恒温箱中倒置培养,以防培养过程中被污染;培养后菌种的保藏方法是:用接种环将单菌落挑出,接种于斜面培养基上,37 ℃培养24小时后置于4 ℃条件下保存。
答案:(1)蛋白胨和酵母提取物 氯化钠
(2)防止外来杂菌的侵入 高压蒸汽灭菌 保证操作过程在酒精灯火焰旁进行
(3)划线分离 倒置 将单菌落用接种环取出 4 ℃
6.大肠杆菌是生存在人体肠道中的正常菌群,每克粪便中含有109个,且能够与致病菌混杂生长。如果食品和饮用水中出现大肠杆菌,就意味着食物可能被粪便污染而带上致病菌,因而常将大肠杆菌的数量作为食品卫生的检测指标之一。请据此回答下列问题:
(1)测定街边出售的奶茶中大肠杆菌的数目,常用涂布分离法。该方法首先配制LB______培养基,进行高压蒸汽灭菌后冷却至60 ℃,在__________旁倒在培养皿中形成平板;对奶茶样品进行一定倍数的稀释,取0.1 mL奶茶稀释液,加在培养皿的固体培养基上,用______________涂布在培养基平面上,然后进行培养;观察统计培养皿中______数目;该数据比实际数值要______(填"高"或"低"),原因是_________________________________。实验完成后需要对培养基进行________处理,然后才能倒掉。
(2)若要对上述培养基中的菌种进行扩大培养,则需配制LB________培养基,灭菌后,将________在酒精灯火焰上烧红后冷却,然后蘸取单菌落中的菌体接种到新的培养基中,在适宜环境中培养________h即可。
解析:(1)微生物的分离通常用固体培养基。为防止杂菌污染,要在酒精灯火焰旁倒