答案:C
11.在PCR扩增的实验中,加入一种提取物(一种模板DNA片段),但实验得到的产物却有2种DNA。其原因可能是( )
A.基因突变
B. Taq DNA聚合酶发生变异
C.基因污染
D.温度过高
解析:此现象属于PCR技术中的假阳性现象,其原因是靶基因污染。因此,在PCR实验中,一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、用一次性吸头等,尽量避免靶基因污染。
答案:C
12.在PCR扩增DNA的实验中,根据设计,一分子DNA经30次循环后,应得到230个DNA分子,但结果只有210个DNA分子。出现该现象的原因可能是( )
①循环次数不够 ②TaqDNA聚合酶活力不够或其活性受到抑制 ③引物不能与亲链结合 ④系统设计欠妥
A.①②③ B.②③④
C.①③④ D.①②③④
解析:②TaqDNA聚合酶活力不够或其活性受到抑制,得到的产物少;③引物设计不合理,可能不能与模板DNA结合,导致无法进行扩增;④PCR系统设置不妥,达不到预期的效果。
答案:B
13.近十年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开 键,称为 ,细胞中在 的作用下使此键断裂。
(2)当温度降低时,引物与模板 端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2个DNA分子,此过程中原料是 ,遵循的原则是 。
(3)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的 和 。前者靠PCR仪自动调控,后者由 维持。
解析:(1)PCR技术利用热变性原理使DNA双链间的氢键断裂,称为变性。
(2)PCR技术扩增DNA与细胞内DNA复制所需原料一样,为4种脱氧核苷酸,遵循的原则是碱基互补配对原则。引物与模板的3'端结合后,DNA聚合酶才发挥作用。
(3)PCR技术与体内DNA复制不完全相同,除了需要模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要液体环境、适宜的温度和pH,适宜的温度靠PCR仪自动调控,而pH靠缓冲液来维持。
答案:(1)氢 变性 解旋酶 (2)3' 4种脱氧核苷酸
碱基互补配对原则 (3)温度 pH 缓冲液
14.在进行DNA亲子鉴定时,需大量的DNA。PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增,获得大量DNA分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。