2018-2019学年 人教版 选修1 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 作业
2018-2019学年 人教版 选修1  土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 作业第5页

  13.如图表示某同学从土壤中筛选出能降低尿素含量的菌株的实验流程。请回答下列有关问题:

  →→→

  (1)实验中应用以________为唯一氮源的培养基筛选能分解尿素的细菌。从功能上讲,该培养基属于________培养基。

  (2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______________旁进行操作。稀释处理的目的是__________________,将接种后的培养皿倒置放在温度适宜的恒温箱中培养,平板倒置培养的目的主要是________________________________。

  (3)配制培养基时,需添加琼脂,琼脂起________作用;培养基中添加________作为指示剂,可使目标菌落的周围产生红色环带。

  (4)该同学在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是______________________;然后将1 mL样液稀释1 000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升样液中分解尿素的微生物活菌数为________个,理论上,统计的菌落数往往________(填"低""等"或"高")于接种的实际活菌数目。

  解析:(1)欲筛选出分解尿素的细菌,培养基中应以尿素为唯一氮源,不能降解尿素的细菌在此培养基上不能生存,这类培养基属于选择培养基。(2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养,为避免杂菌污染,每一步操作都要在酒精灯火焰旁进行。为了得到单个菌落,需将土壤溶液进行一系列的梯度稀释。为防止水蒸气在皿盖上凝结成水滴并落入培养基造成污染,培养皿需要倒置在恒温培养箱中培养。(3)液体培养基中难以得到成型的菌落,而固体培养基上可以形成肉眼可见的菌落,因此需要加入琼脂作为凝固剂。目标细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨,氨使培养基pH升高,酚红指示剂变红,因此可加入酚红作为指示剂。(4)将1 mL样液稀释1 000倍,在3个平板上分别接入0.1 mL,经培养后3个平板菌落的平均数是(49+47+45)÷3=47(个),则每升样液中分解尿素的微生物活菌数为47÷0.1×1 000×1 000=4.7×108(个)。

  答案:(1)尿素 选择 (2)酒精灯火焰 得到单个菌落 防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染 (3)凝固 酚红 (4)检测平板培养基灭菌是否合格 4.7×108 低

14.某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题: