(2)自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由　　　　　　　　　　替代。

(3)装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是　。

(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体　　　　　　(填"相同"或"不同"),洗脱时,对洗脱液的流速要求是　　　　　　　　。

答案:(1)a　a相对分子质量较大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快

　　 (2)尼龙网和尼龙纱

　　(3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果

　　(4)相同　保持稳定

解析:用凝胶色谱技术分离各种大分子物质时,大分子物质先洗脱出来,然后是小分子物质。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能在颗粒之间移动,所以向下移动的速度较快。小分子物质可以进入凝胶颗粒的微孔,下移速度落后于大分子物质,从而落后于大分子物质洗脱出来。在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密,以降低凝胶颗粒之间的空隙。同时在装填凝胶柱时,不得有气泡存在,因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。

三、综合应用

8.科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力,受到研究者重视。

(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法,其原理是根据蛋白质分子的　　　　　　　、大小及形状不同,在电场中的　　　　　　　　不同而实现分离。

(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供　　　　和　　　　。

(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后,比较两种培养基中菌落的　　　　,确定该蛋白质的抗菌效果。

(4)细菌培养常用的接种方法有　　　　　　　　　　和　　　　　　　　。实验结束后,对使用过的培养基应进行　　　　处理。

答案:(1)电荷(带电情况)　迁移速度　

　　(2)碳源　氮源　

　　(3)数量　

　　(4)平板划线分离法　涂布分离法　灭菌

解析:(1)电泳法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子的带电情况、大小、形状不同,在电场中的迁移速度不同而实现分离。(2)在微生物的培养过程中,培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供碳源和氮源。(3)若抗菌活性蛋白的抗菌效果好,则在培养基中加入该抗菌蛋白后,接种等量的菌液,与未加入抗菌蛋白的培养基相比,菌落数目应该少,否则数目应该相当。(4)细菌培养接种的常用方法有平板划线分离法和涂布分离法。在实验结束后,应对使用过的培养基进行灭菌,防止污染环境。