专题5 课题2　多聚酶链式反应扩增DNA片段

　　一、选择题

　　1．PCR技术控制DNA的解聚与结合所利用的DNA的原理是(　　)

　　A．特异性　　　　　　　　　 B．稳定性

　　C．热变性 D．多样性

　　解析：选C。DNA分子在80～100 ℃的温度范围内变性，双链解聚成单链；当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合形成双链。PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。

　　2．PCR反应体系中含有热稳定性高的DNA聚合酶， 下图所示的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为(　　)

　　A．DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到DNA片段的3′端上

　　B．DNA聚合酶只能将两个DNA片段连接起来

　　C．DNA聚合酶只能将两条脱氧核苷酸链连接起来

　　D．以上叙述均错误

　　解析：选A。DNA聚合酶的作用是将单个脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链上，但起点为DNA片段3′端，题图所示的过程无该条件，所以不能正确反映DNA聚合酶的功能。

　　3．标准的PCR反应过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是(　　)

　　A．95 ℃、55 ℃、72 ℃ B．72 ℃、55 ℃、95 ℃

　　C．55 ℃、95 ℃、72 ℃ D．80 ℃、50 ℃、72 ℃

　　解析：选A。当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链，称为变性；当温度下降到50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，称为复性；当温度上升到72 ℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。

4．PCR技术扩增DNA的过程中，DNA片段经若干次扩增，下列与其数目的理论值变化相符的是(　　)