段已知的目的基因的核苷酸序列和根据核苷酸序列合成的引物。
答案:A
6.下列符合PCR反应条件的是( )
①稳定的缓冲液环境 ②DNA模板 ③合成引物 ④4种脱氧核苷酸 ⑤DNA聚合酶 ⑥DNA解旋酶 ⑦限制性核酸内切酶 ⑧温控设备
A.①②③④⑤⑥ B.①②③④⑤⑥⑦⑧
C.③④⑤⑥⑦⑧ D.①②③④⑤⑧
解析:PCR反应应模拟生物细胞内DNA复制的条件,只是无需解旋酶(可热变性),也不需要基因工程的工具酶(限制性核酸内切酶)。
答案:D
7.从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大,其原因不包括( )
A.蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更易失活
B.蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法
C.提取某种特定蛋白质时需根据其特性摸索提取的程序
D.提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步
解析:提取蛋白质比提取DNA的难度大,是因为与DNA相比,蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更容易失活;并且蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法,只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件,设计特定的方法;血红蛋白是位于红细胞内的含Fe2+的蛋白质,其分离和提取程序大致为:样品处理、粗分离、纯化和纯度的鉴定,但这一点不是提取蛋白质难度大的原因。
答案:D
8.做DNA粗提取和鉴定实验时,实验材料用鸡血而不用猪血的原因是( )
A.鸡血的价格比猪血的价格低
B.猪的红细胞没有细胞核,不能提取到DNA
C.鸡血不凝固,猪血会凝固
D.用鸡血提取DNA比用猪血提取操作简便
解析:猪属于哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞无细胞核,不能提取到DNA。
答案:B
9.下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验的叙述,正确的是( )
A.前者选择鸡血细胞作为材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好
B.样品预处理时,前者静置1天处理除去上清液;后者需要加入清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色
C.在DNA粗提取实验中,往物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水析出DNA时,应该缓慢加入,直到出现黏稠物为止
D.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等
解析:鸡血细胞有细胞核,适于提取DNA;哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中,洗涤红细胞时,不能加清水,应该加入生理盐水,否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合,加大提取难度。DNA初次析出时,加蒸馏水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白,以利于血红蛋白的分离和纯化。
答案:A
10.某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是( )
A.加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨
B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNA
C.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌
D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热
解析:A项中,应该是加入洗涤剂和食盐后进行轻缓、充分的搅拌和研磨,故错误。B项中,加入蛋白酶,消除滤液中的蛋白质,用于纯化DNA,故正确。C项中,DNA不溶于酒精溶液,加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌