A．构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体

　　B．构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体

　　C．图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有两个游离的磷酸基团

　　D．用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA

　　解析：选D。用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体会形成相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；由于Sau3AⅠ的切割位点在EcoRⅠ的两个酶切位点之间，因此，用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体会形成相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；P1噬菌体载体为环状DNA，其上只含有一个EcoRⅠ的酶切位点，因此用EcoRⅠ切割后，该环状DNA分子变为双链DNA分子，因每条链各含有一个游离的磷酸基团，故切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；由图甲可知，用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体后形成的黏性末端相同，可任意连接，不止产生一种重组DNA，D错误。

　　6．(2018·广州高二检测)下图所示的酶M和酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其他碱基的种类未作注明。请据图回答下列问题：

　　(1)酶M特异性切割的DNA片段是，则酶N特异性切割的DNA片段是______。

　　(2)多个片段乙和多个片段丁混合在一起，用DNA连接酶拼接得到环状DNA，其中只由两个DNA片段连接成的环状DNA分子有________种。

　　解析：限制酶识别的是DNA上特定的回文序列，切割的是特定部位的磷酸二酯键。既然酶M识别的是片段乙和丙相接后的特定序列，那么酶N识别的就一定是片段甲和乙相接后的特定序列，这两个序列都具有回文的特点。片段乙和片段丁是同种限制酶切割后形成的，二者存在相同的黏性末端，完全可以首尾相接，形成环状的DNA分子(乙-丁)；又由于是多个片段混合在一起，乙和丁本身也会发生"两两"连接，形成(乙-乙)和(丁-丁)两种环状的DNA分子。

答案：(1)　(2)3