D.扩增区域由2个引物来决定
解析:PCR是体外DNA扩增技术,该技术是在高温条件下进行的,因此需要耐高温Taq DNA聚合酶,故A正确;DNA大小不同,在电场中的迁移速率不同,故B正确;PCR不需要DNA连接酶,但需要热稳定DNA聚合酶,故C错误;PCR技术需要一定的条件,其中一对引物就是条件之一,故D正确。
答案:C
5.随着研究的不断深入,PCR技术被不断改进,从原先只能扩增几个kb(千碱基对)的基因到目前已能扩增长达几十个kb的DNA片段。PCR的简要过程如下图所示,请分析回答下列有关问题:
(1)通过分析得出新合成的DNA分子中,A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循________。
(2)若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(3)DNA子链复制的方向是________,这是由于____________。
解析:(1)分析得出新合成的DNA分子中,A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循碱基互补配对原则。
(2)在DNA分子扩增时,需要两种引物,由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点,故所需的引物数目等于新合成的DNA子链数目,即2×210-2=(211-2)个。
(3)引物是一种单链DNA或RNA分子,它能与解开的DNA母链的3′端结合,为DNA聚合酶提供延伸位点,使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸,从而决定了DNA子链复制的方向是从5′端到3′端。
答案:(1)碱基互补配对原则
(2)211-2
(3)5′端到3′端 DNA聚合酶只能从引物的3′端拼接单个脱氧核苷酸分子
A级 基础巩固
1.下列有关PCR过程的叙述中不正确的是( )
A.受热变性破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.引物与单链相应互补序列结合是依靠碱基互补配对原则完成
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸