（4）为了筛选含重组质粒的受体菌，应在培养基中额外加入______________培养一段时间，挑选出___________色的菌落进一步培养。原来质粒中，限制酶M和N的酶切位点应该位于___________。

A．M位于青霉素抗性基因中，N位于lacZ基因中

B．N位于青霉素抗性基因中，M位于lacZ基因中

C．M和N都位于青霉素抗性基因中

D．M和N都位于lacZ基因中

（5）以此题为例，简述如何正确判断酶切位点的位置：_______________________。

23．浮萍是简单的单子叶水生漂浮植物，被广泛应用于除草剂的筛选、水环境污染的修复；浮萍的淀粉和蛋白含量高而被开发为生物质能和优质蛋白生产的优势原料。本研究拟通过在浮萍中过表达大豆液泡膜抗盐基因来增强浮萍的抗盐性，以期获得能够应用于盐碱水域生长，并净化污水的浮萍株系。

（1）通过分析农杆菌转GUS基因的效率，筛选能进行高效的转化的菌种。GUS组织化学染色是将外植体浸没于GUS染液中染色。GUS瞬时表达率=（有相应级别GUS基因瞬时表达的外植体数/外植体总数）╳100%。使用不同农杆菌对抗性浮萍愈伤组织的GUS瞬时表达率检测结果如下图，通过检测结果显示________，因此浮萍遗传转化确定选用农杆菌EHA105。

（2）本实验使用添加不同浓度乙酰丁香酮的菌液侵染浮萍，据下图实验结果发现随着____________，侵染效率_________________。乙酰丁香酮浓度为100μmol/L时，浮萍的侵染效率比乙酰丁香酮浓度为200μmol/L时高出了_____%。

（3）在农杆菌介导的遗传转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。植物材料和农杆菌共培养结束后，转化组织需要脱菌培养，需要用抑菌类抗生素抑制农杆菌的生长，以防止农杆菌过度生长对转化组织产生毒害作用。因此选择合适的抑菌抗生素和浓度很关键。OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度，通常用于细菌细胞密度(OD600)测量。由上图可知， _______在低浓条件对农杆菌EHA105有更很好的抑制效果；其最佳浓度都选用300mg/L的原因是_______________。

（4）请总结如何正确提取坐标图中的信息，以（3）中图像为例加以说明____________________________________________。

（5）浮萍已被成功用于植物生物反应器方面的开发和生产。植物生物反应器是指利用植物细胞、组织、器官或整株植株，大量生产具有重要功能的蛋白质，如抗体、疫苗或次生代谢产物等。与动物细胞和微生物发酵相比，具有明显的优势，如植物细胞具有______，能够脱分化和再分化。

24．为研究肝癌致病机理，科研工作者利用下图所示的差异杂交法和基因工程获取相关癌基因以作进一步研究。请据图回答问题：

（1）图 1 中，A 过程需要用___________ 酶，D 过程需要回收___________ （填"未杂交"或"杂交分子"）的含 32P 的 cDNA 单链，继而通过人工合成，获得___________， 并用其构建基因文库。

（2）分子生物学检测是基因工程成功与否的重要一环，其中检测目的基因是否发挥功能作用的第一 步是检测_________________________ ，若检测目的基因是否成功表达，则需用_______________ 方 法，该方法的原理是_____________________。

（3）上图 2 为改造后的目的基因。图 3 为两种质粒，其中 Ampr 为氨苄青霉素抗性基因，Tetr 为四环素抗性基因，lacZ 为蓝色显色基因，其表达产物可使底物 X-Gal 呈蓝色。EcoRⅠ（0.7Kb）、NotⅠ（1.2Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离（1kb=1000 个碱基对）。